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广泛的Fab-arm交换影响所有内源性血清IgG4
Widespread Fab-arm exchange affects all endogenous serum IgG4
摘要
在所有人类抗体中，IgG4因其能够解离为半分子并重新组装形成新型双价抗体而脱颖而出。尽管这种所谓的Fab-arm交换机制已被公认，但关于血清中所有IgG4克隆是否都参与此过程的详细分析尚不清楚。本文通过引入一种基于液相色谱-质谱联用的方法，能够分析血清IgG4克隆库，我们证明在健康供者的血清中发生了广泛的Fab-arm交换，并导致IgG4克隆库分子多样性的巨大扩展。这些发现为IgG4提供了新的见解，它在过敏、自身免疫和疫苗接种环境中起着关键作用，也可能影响IgG4作为治疗药物支架的应用。
实验方法
产品清单
| 名称 | 品牌 | 货号 |
|---|---|---|
| CaptureSelect IgG4 (Hu) 亲和基质 | Thermo Fisher Scientific | -- |
| 带螺旋盖的 Pierce 离心柱 | Thermo Fisher Scientific | -- |
| Eppendorf 恒温振荡器 | Eppendorf | -- |
| Eppendorf 低吸附管 | Eppendorf | -- |
| FabRICATOR (IdeS 酶) | Genovis | -- |
| CaptureSelect IgG1 (Hu) 亲和基质 | Thermo Fisher Scientific | -- |
| Amicon 10 kDa 分子量截留滤器 | Merck Millipore Ltd | -- |
| Nanodrop 分光光度计 | Thermo Fisher Scientific | -- |
| Agilent 1260 Infinity 高效液相色谱系统 | Agilent | 1260 |
| ACQUITY UPLC BEH SEC 色谱柱 | Waters | 200 Å |
| Labconco Freezone 2.5 L -80°C 冻干机 | Labconco | -- |
| 恒温混匀仪 | -- | -- |
| EvoTip C18 捕集柱 | EvoSep Biosystems | -- |
| Bruker timsTOF HT 质谱仪 | Bruker | timsTOF HT |
| EvoSep One 液相色谱系统 | EvoSep | -- |
| Evosep Performance 色谱柱 | Evosep | EV1109 |
| Orbitrap Exploris 480 质谱仪 | Thermo Fisher Scientific | Exploris 480 |
| Vanquish Neo 超高效液相色谱系统 | Thermo Fisher Scientific | Neo |
| MabPac RP 分析柱 | Thermo Fisher Scientific | -- |
| 液相色谱-质谱联用系统 | -- | -- |
| 超高效液相色谱系统 | -- | -- |