胸膜感染的微生物学诊断:一种新型综合征实时PCR组合的比较评估

Microbiological diagnosis of pleural infections: a comparative evaluation of a novel syndromic real-time PCR panel

作者信息Øyvind Kommedal, Tomas Mikal Eagan, Øystein Fløtten, Truls Michael Leegaard, William Siljan, Hilde Fardal, Bjørnar Bø, Fredrik Grøvan, Kjersti Wik Larssen, Arne Kildahl-Andersen, Reidar Hjetland, Rune Tilseth, Sølvi Kristine Øyen Hareide, Marit Tellevik, Ruben Dyrhovden
PMID38656204
发布时间2024-06
DOI10.1128/spectrum.03510-23

摘要

当前胸膜感染的微生物诊断方法存在不足。使用16S靶向二代测序的研究表明,仅10%-16%存在的细菌能被培养出来,且50%-78%含有相关微生物DNA的胸膜液培养呈阴性。作为一种适用于临床实验室的快速诊断替代方案,我们探索了基于PCR的方法。基于关键病原体的鉴定,我们开发了一个针对社区获得性胸膜感染(CAPI)的综合征PCR组合。这是一个实用的PCR组合,意味着其设计目的并非检测所有可能涉及的细菌种类,而是为了确认CAPI的诊断,并检测可能影响抗菌治疗选择的细菌。我们在109例先前通过培养和16S靶向二代测序表征的确认CAPI样本上评估了该PCR组合。该PCR在107/109例(98.2%)中确保了CAPI的诊断,并在69/109例(63.3%)中检测到了所有存在的病原体。培养在54/109例(49.5%)中确保了诊断,并在31/109例(28.4%)中检测到了所有病原体。16S靶向二代测序的相应结果为109/109例(100%)和98/109例(89.9%)。对于PCR组合中包含的细菌种类,PCR的灵敏度为99.5%(184/185),培养为21.6%(40/185),16S靶向二代测序为92.4%(171/185)。存在的、未被PCR组合覆盖的细菌种类均被判定为不影响抗菌治疗。一个综合征PCR组合代表了一种快速且灵敏的替代方案,可用于当前CAPI微生物学诊断的方法。重要性:脓胸是一种死亡率高且发病率不断上升的严重感染。长期的住院治疗和长期的抗菌治疗疗程推高了医疗和生态成本。目前胸膜感染的微生物诊断方法不足。最近使用16S靶向二代测序作为参考标准的研究发现,培养仅能检出10%-16%存在的细菌,且50%-78%含有相关细菌DNA的样本培养仍为阴性。为了确认胸膜感染的诊断并确定最佳抗菌治疗方案,同时限制广谱抗生素的不必要使用,需要快速且灵敏的诊断方法。PCR是一种非常适合临床实验室的快速方法。在本文中,我们展示了一种新型综合征PCR组合可以确保胸膜感染的诊断,并以高灵敏度检测所有与抗菌治疗选择相关的细菌。

实验方法

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