在禽类宿主中获得PB2-384L/443R/460M特征的小鼠致死性H5N1流感病毒能有效利用人类ANP32A/B蛋白

物种特异性的酸性核磷蛋白32 kDa成员（ANP32A/B）在限制禽流感病毒聚合酶在哺乳动物宿主中的功能方面起着关键作用。禽流感病毒在人类中复制时，可能会在聚合酶碱性2（PB2）蛋白中获得关键的氨基酸替换（例如E627K和D701N），这些替换增强了病毒聚合酶与人类ANP32A和ANP32B蛋白的功能兼容性，从而提高了病毒在人类中的复制效率和致病潜力。然而，某些H5N1禽流感病毒已证明在没有典型的PB2-627K或PB2-701N适应性突变的情况下，仍能建立有效的人类感染；其潜在的分子机制仍未完全阐明。在本研究中，我们发现两种H5N1病毒，即A/chicken/LN/SD035/2018 (LN35)和A/duck/JL/S1261/2019 (JL261)，在遗传上相似，但它们对小鼠的致病性不同。通过评估小鼠体内的一系列单基因重配病毒和突变体，我们证实PB2-384L/443R/460M特征对LN35在小鼠中维持高致死率至关重要。我们进一步揭示了携带PB2-384L/443R/460M特征的H5N1禽流感病毒聚合酶能够有效利用人类ANP32A/B。此外，我们发现该PB2-384L/443R/460M特征正向调控H5N1病毒核糖核蛋白复合物（vRNP）与人类ANP32A/B的相互作用以及vRNP的组装。我们的研究结果表明，H5N1病毒PB2基因中的关键氨基酸替换可能在禽类宿主中出现，然后增强其与人类ANP32A/B蛋白相互作用的能力，强调了H5N1病毒在禽类群体中持续传播和进化所带来的重大人畜共患病和公共卫生风险。