肾连接蛋白通过EGFR信号通路促进眼周间充质细胞迁移

目的：肾连接蛋白是一种在多种组织发育和稳态中具有多种功能的细胞外蛋白，但其在早期小鼠角膜发育中的作用尚未被探索。我们表征了肾连接蛋白的表达，并研究了其在角膜发育中的功能。 方法：我们对胚胎第11.5天至第16.5天小鼠胚胎的眼部切片进行了原位杂交和免疫组织化学分析。分析了野生型和肾连接蛋白突变体胚胎的角膜厚度、细胞数量和细胞增殖情况。我们评估了肾连接蛋白受体整合素α8和表皮生长因子受体的表达。我们在EGFR和STAT3抑制剂存在的情况下，使用眼周间充质外植体进行了体外迁移实验。 结果：肾连接蛋白mRNA在外胚层、晶状体、视杯以及随后的角膜内皮中表达。肾连接蛋白的蛋白表达与mRNA染色相关，并额外定位于上皮基底膜和眼周间充质。与野生型同窝仔相比，肾连接蛋白突变体表现出角膜厚度和细胞数量减少，但细胞增殖没有差异。整合素α8 mRNA在眼周间充质中弥散表达，但不在迁移区域表达。EGFR mRNA在迁移的眼周间充质区域表达。在肾连接蛋白或纤连蛋白基质上培养的眼周间充质外植体均发生了显著的细胞迁移，但EGFR通路抑制剂仅减弱了在肾连接蛋白基质上的迁移。 结论：肾连接蛋白在眼部发育期间表达于眼周区域，并通过涉及激活EGFR信号通路的机制促进眼周间充质迁移至新生角膜中。