抗原增强的CD4CAR T细胞在多种非人灵长类动物HIV模型中均未能扩增或控制病毒血症

嵌合抗原受体T（CAR T）细胞疗法已在B细胞恶性肿瘤中显示出治愈潜力；然而，将这一成功转化为针对HIV等慢性感染的治疗仍是一项重大挑战。在接受抑制性抗逆转录病毒治疗（ART）的HIV感染者中，低抗原水平限制了CAR T细胞的扩增和持久性。我们先前报告了一项初步研究的数据，表明HIV靶向的CD4CAR T细胞可通过外源性抗原补充来克服这一障碍，从而实现强劲的体内扩增。本文旨在全面证实并扩展这些发现。我们测试了一系列增强CD4CAR T细胞效能的策略，包括CRISPR-Cas9介导的免疫检查点和HIV相关基因编辑、工程化CAR T细胞的单次和混合竞争性输注、包含CD28或4-1BB共刺激结构域的不同CAR构建体，以及外源性抗原增强。我们还开发了高灵敏度的微滴数字聚合酶链反应检测方法，以定量CAR T细胞频率，并验证基于流式细胞术的CD4CAR T细胞扩增定量。我们在多种非人灵长类动物（NHP）HIV模型（包括猿猴免疫缺陷病毒和猿-人免疫缺陷病毒感染、ART抑制的NHP）中评估了这些新方法。尽管CD4CAR T细胞产品在体外表现出抗原特异性增殖和细胞毒性，但它们在体内未能扩增、持久存在或控制病毒血症。我们也未能证实我们早期研究中（该研究已被撤回）先前观察到的CD4CAR T细胞扩增。总之，这些数据强调了在免疫功能正常的环境中增强抗HIV CD4CAR T细胞效能的替代策略的必要性。