Hippo-YAP1信号通路失调激活诱导氧化应激及胆道闭锁肝内胆管细胞异常发育

经典的Hippo-YAP1信号通路对肝脏发育和再生至关重要，但其在胆道闭锁(BA)肝内胆管修复和再生中的作用尚不清楚。本研究通过定量逆转录PCR(qRT-PCR)和双重免疫荧光检测了BA患者和恒河猴轮状病毒诱导的实验性BA小鼠模型肝组织中的YAP1表达。构建并培养了小鼠EpCAM表达细胞来源的肝脏类器官，并用Hippo-YAP1通路激活剂(Xmu-mp-1和TRULI)或抑制剂(Peptide17)进行处理。进行了形态学、免疫荧光、RNA测序(RNA-seq)和生物信息学分析。通过qRT-PCR和荧光激活细胞分选(FACS)分析评估了转染组成性活性YAP1(YAPS127A)质粒的人肝内胆管上皮细胞的氧化应激水平。通过双重免疫荧光检测了BA和实验性BA小鼠模型肝脏中PRDX1的表达。结果显示，在BA和实验性BA小鼠模型肝脏中，表达EpCAM的胆管细胞的YAP1 mRNA表达和核定位均增加。在用Hippo-YAP1激活剂处理的类器官中，观察到肝内类器官发育异常、氧化应激反应基因Sod3和Prdx1的差异表达、氧化应激以及线粒体活性氧相关基因集的富集，而类器官的发育不受Hippo-YAP1抑制剂添加的影响。转染组成性活性YAP1导致人肝内胆管上皮细胞中PRDX1表达下调和氧化应激。此外，在人BA和实验性BA小鼠肝脏的胆管中也观察到PRDX1表达降低。总之，Hippo-YAP1信号通路的失调激活会诱导氧化应激并损害肝内胆管类器官的发育，这表明靶向Hippo-YAP1信号通路的治疗策略可能具有改善BA患者胆道修复和再生的潜力。