内皮细胞源性细胞外囊泡通过circ_0008362/miR-1251-5p/Runx2轴促进糖尿病动脉钙化

引言：动脉钙化是心血管事件的独立预测因子，会增加糖尿病患者的发病率和死亡率，但其机制尚不清楚。细胞外囊泡在细胞间通讯中起重要作用。本研究探讨了高糖条件下内皮细胞源性细胞外囊泡在调节血管平滑肌细胞钙化中的作用及潜在机制，旨在为糖尿病动脉钙化开发有效的预防和治疗策略。结果：结果显示，高糖诱导的内皮细胞来源的细胞外囊泡呈双层结构，平均直径为74.08±31.78 nm，表达CD9、CD63和TSG101等EV标志物，但不表达钙联接蛋白。ECHG-EVs可被VSMCs内化，并通过增加Runx2表达和矿化结节形成来诱导VSMC钙化。circ_0008362在ECHG-EVs中富集，并可传递给VSMCs，在体外和体内均促进VSMC钙化。机制上，miR-1251-5p可能是circ_0008362的靶点之一，两者在VSMCs的细胞质中共定位。Runx2被鉴定为miR-1251-5p的下游靶点，circ_0008362作为海绵吸附miR-1251-5p，从而增强Runx2表达并促进VSMC钙化。此外，circ_0008362可直接与Runx2相互作用，加剧VSMC钙化。值得注意的是，在小鼠血管中检测到DiR标记的ECHG-EVs。同时，在小鼠钙化动脉组织中，circ_0008362和Runx2水平显著升高，而miR-1251-5p表达显著降低。然而，用GW4869抑制EVs的释放可减轻糖尿病小鼠的动脉钙化。最后，与正常对照组相比，糖尿病患者血浆EVs中circ_0008362的循环水平显著更高。血浆EVs circ_0008362水平升高与糖尿病患者更严重的冠状动脉和主动脉钙化相关。结论：我们的研究结果表明，circ_0008362在内皮细胞来源的EVs中富集，并通过海绵吸附miR-1251-5p上调Runx2表达以及直接与Runx2相互作用，在高糖条件下促进VSMC钙化。此外，血浆EVs circ_0008362水平升高与糖尿病患者更严重的冠状动脉和主动脉钙化相关。这些结果可能作为糖尿病动脉钙化的潜在预防和治疗靶点。