临床试验评估FSN对膝骨关节炎伴神经病理性疼痛患者的疗效
评估FSN治疗对膝骨关节炎相关神经病理性疼痛患者的临床疗效。
纳入11例膝骨关节炎患者,在FSN治疗前及治疗后1周、2周,评估VAS、WOMAC、Lequesne指数、步行速度和主动/被动关节活动度。
Fu's subcutaneous needling promotes axonal regeneration and remyelination by inhibiting inflammation and endoplasmic reticulum stress
包含临床试验(11例膝骨关节炎患者)与CCI大鼠模型,并通过行为学、电生理、组织学、RNA-seq及蛋白检测等多层级验证。
膝骨关节炎伴神经病理性疼痛患者 CCI诱导的坐骨神经痛大鼠模型
CCI模型构建:坐骨神经用3-0铬肠线松散结扎 FSN治疗时间点:CCI诱导后第1、3、5、7天,每周四次 动物分组:Sham、CCI、CCI+FSN、FSN四组,每组8只 行为学检测:von Frey纤维丝测定机械性异常性疼痛、坐骨神经功能指数 电生理检测:复合肌肉动作电位振幅
提炼研究问题、关键发现与证据,快速把握文章的核心贡献。
按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。
评估FSN治疗对膝骨关节炎相关神经病理性疼痛患者的临床疗效。
纳入11例膝骨关节炎患者,在FSN治疗前及治疗后1周、2周,评估VAS、WOMAC、Lequesne指数、步行速度和主动/被动关节活动度。
建立CCI诱导的坐骨神经痛大鼠模型,并设置实验分组。
32只SD大鼠随机分为四组:Sham、CCI、CCI+FSN、FSN。CCI组用3-0铬肠线松散结扎右侧坐骨神经;Sham组仅暴露坐骨神经不结扎。
验证FSN治疗对CCI大鼠模型的影响。
在CCI诱导后第1、3、5、7天,对CCI+FSN组大鼠进行FSN治疗,每次约1分钟。
评估FSN治疗对CCI大鼠神经病理性疼痛行为学和电生理指标的影响。
在FSN治疗第7天,对所有动物进行von Frey测试、坐骨神经功能指数(SFI)分析和复合肌肉动作电位(CMAP)振幅检测。
观察FSN治疗对CCI大鼠坐骨神经组织病理学和超微结构的影响。
通过H&E染色和透射电子显微镜(TEM)观察坐骨神经的形态学变化,包括轴突肿胀、髓鞘异常、髓鞘纤维数量、ER池扩张等。
探究FSN治疗缓解CCI大鼠神经病理性疼痛的分子机制。
通过RNA测序对坐骨神经组织进行转录组分析,并通过ELISA和免疫印迹检测背根神经节中炎症因子和ER应激相关蛋白的表达。
按研究目的归类文中使用的方法,便于定位所需技术。
| 实验环节 | 名称 | 品牌 | 货号 |
|---|---|---|---|
| FSN治疗 | 一次性浮针 | Nanjing Paifu Medical Science and Technology Co., Nanjing, China | -- |
| 电生理记录 | Sierra Summit软件 | Cadwell Industries, Inc. | -- |
| 行为学测试 | von Frey纤维丝 | -- | -- |
| 透射电子显微镜 | JEOL JEM-1400透射电子显微镜 | JEOL | -- |
| Ultracut S超薄切片机 | Leica Reichart | -- | |
| RNA提取 | REzol C&T试剂 | PROtech Technologies, Inc. | -- |
| RNeasy Plus Universal Kit | Qiagen | -- | |
| RNA测序 | TruSeq RNA链特异性文库制备试剂盒 | Illumina | -- |
| Illumina Novaseq 6000测序仪 | Illumina | -- | |
| ELISA检测 | IL-6 ELISA试剂盒 | R&D Systems | -- |
| IL-1β ELISA试剂盒 | R&D Systems | -- | |
| MCP-1/CCL2 ELISA试剂盒 | Abcam | -- | |
| IL-18 ELISA试剂盒 | Elabscience | -- | |
| 免疫印迹 | p-IRE1α抗体 | novus | NB-100-2323 |
| p-PERK抗体 | boster | P01992 | |
| p-eIF2α抗体 | cell signaling | 9721S | |
| ATF4 (B-3)抗体 | santa cruz | sc-390063 | |
| ATF6抗体 | abnova | MAB19823 | |
| GADD153 (B3)抗体 | santa cruz | sc-7351 | |
| GAPDH抗体 | Ireal | IR3-8 | |
| m-IgGκ BP-HRP二抗 | santa cruz | sc-516102 | |
| 山羊抗兔IgG二抗 | abcam | ab97051 | |
| 免疫组化 | CD68抗体 | millipore | MAB1435 |
| S100抗体 | invitrogen | MA1-26621 | |
| 突触素抗体 | abcam | ab32127 | |
| TNFα抗体 | abcam | ab220210 | |
| NGF抗体 | merck | ab9040 |
汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。
| 环节 | 核对要点 |
|---|---|
| 临床试验 | 患者纳入标准、FSN具体操作方案、评估时间点 阅读提示:Materials and Methods - Human subjects; Results - 第一部分 |
| 动物模型 | 大鼠品系、周龄、性别、CCI手术具体步骤、麻醉剂量 阅读提示:Materials and Methods - Animal groups and sciatic nerve surgery; Results - 第一部分 |
| FSN治疗 | FSN具体操作细节、治疗时间点和频率、治疗时长 阅读提示:Materials and Methods - Fu's subcutaneous needling |
| 行为学测试 | von Frey纤维丝规格、测试方法、SFI计算公式 阅读提示:Materials and Methods - Mechanical allodynia (von Frey test), Sciatic functional index (SFI) |
| 电生理检测 | 麻醉药物及剂量、刺激参数、记录方法 阅读提示:Materials and Methods - Electrophysiological measurement |
| 组织学分析 | 组织处理、切片厚度、染色方法、显微镜型号 阅读提示:Materials and Methods - Transmission electron microscopy (TEM), Immunohistochemical analysis; Results - 第二部分 |
| 分子机制检测 | RNA提取方法、测序平台、数据分析流程;ELISA和Western blot的具体操作、抗体稀释比例 阅读提示:Materials and Methods - RNA extraction and library preparation, RNA sequencing data analysis, Spinal cord expression of inflammatory factors, Western blot; Results - 第三、四部分 |