肿瘤细胞释放的自噬体（TRAPs）诱导PD-L1修饰的中性粒细胞胞外陷阱（NETs）抑制T细胞功能以促进乳腺癌肺转移

背景：肺转移是乳腺癌相关死亡的主要原因。中性粒细胞胞外陷阱（NETs）参与乳腺癌的进展。然而，NET形成的机制尚不完全清楚。本研究假设肿瘤细胞释放的自噬体（TRAPs）在这一过程中起着关键作用。方法：从乳腺癌细胞系中分离TRAPs，分析其对人和小鼠中性粒细胞NET形成的影响。研究使用了体外和体内模型，包括Toll样受体4（TLR4-/-）小鼠和工程化乳腺癌细胞系。采用免疫荧光、ELISA、Western blotting、RNA测序和流式细胞术来剖析导致NET产生的信号通路，并探索其免疫抑制效应，特别关注NETs对T细胞功能的影响。使用DNase I和αPD-L1抗体评估了靶向TRAP诱导的NETs及其免疫抑制功能的治疗潜力。通过将乳腺癌患者循环中TRAPs和NETs的水平与肺转移相关联来评估临床相关性。结果：本研究表明，TRAPs通过使用高迁移率族蛋白B1（HMGB1）并激活TLR4-Myd88-ERK/p38信号轴，诱导人和小鼠中性粒细胞形成NETs。更重要的是，TRAP诱导的NETs携带的PD-L1在体外和体内抑制了T细胞功能，从而促进了肺转移前微环境（PMN）的免疫抑制形成。相比之下，体内循环TRAPs减少的Becn1 KD-4T1乳腺肿瘤减少了NETs的形成，进而减弱了PMN中的免疫抑制效应，并导致小鼠模型中乳腺癌肺转移的减少。此外，使用降解NETs的DNase I联合αPD-L1治疗恢复了T细胞功能并显著减少了肿瘤转移。乳腺癌患者外周血中的TRAP水平与NET水平和肺转移呈正相关。结论：我们的结果证明了TRAPs在形成PD-L1修饰的NETs中的新作用，这可能为乳腺癌患者肺转移的早期检测和治疗提供新策略。