脂肪干细胞来源的细胞外囊泡通过介导ADAM17/MerTK影响巨噬细胞胞葬作用从而调控脓毒症相关急性肾损伤后肾小管上皮细胞凋亡的机制

目的：本研究探讨了脂肪干细胞来源的细胞外囊泡通过调节ADAM17/MerTK介导的巨噬细胞胞葬作用，改善脓毒症相关急性肾损伤后肾小管上皮细胞凋亡的分子机制。方法：通过盲肠结扎穿孔术建立S-AKI小鼠模型并静脉注射ADSC-EVs。用LPS培养小鼠肾巨噬细胞，在转染oe-ADAM17或si-MerTK的同时用EVs培养，然后与Jurkat细胞共孵育。使用比色法、免疫组化、Western blot和ELISA测定小鼠血清尿素、肌酐、KIM-1、胞葬和凋亡相关蛋白、炎症因子、细胞因子和可溶性MerTK水平。分别通过HE染色、TUNEL染色、免疫荧光和流式细胞术评估肾小管损伤、TEC凋亡、巨噬细胞胞葬作用和M1/M2极化水平。进行了体内验证实验。结果：S-AKI小鼠血清尿素、肌酐、KIM-1、促炎因子、促凋亡蛋白和ADAM17蛋白水平升高，抗凋亡蛋白和MerTK蛋白水平降低，M2极化减弱。ADSC-EVs下调了S-AKI小鼠肾组织和LPS诱导的小鼠肾巨噬细胞中ADAM17和sMerTK，增加了细胞膜MerTK、巨噬细胞对凋亡细胞的识别和胞葬作用以及M2极化，表明ADSC-EVs调节了ADAM17/MerTK介导的巨噬细胞胞葬作用并促进M2极化。MerTK沉默部分逆转了ADSC-EVs调节的LPS诱导的小鼠肾巨噬细胞胞葬作用和M2极化。在体内，ADAM17上调部分阻断了ADSC-EVs调节的小鼠肾组织S-AKI后TEC凋亡。结论：ADSC-EVs通过调节ADAM17下调sMerTK水平并上调巨噬细胞膜MerTK蛋白水平，从而促进巨噬细胞胞葬作用，改善S-AKI后TEC凋亡和炎症。