警惕你的“卵母细胞特异性”Cre品系：多种Zp3-Cre系和Gdf9-iCre转基因系中的体细胞Cre表达

多个zona pellucida 3 (Zp3)-Cre驱动小鼠品系被用于实现卵母细胞的条件性功能缺失研究。目前由杰克逊实验室活体保存的Knowles Zp3-Cre品系是发表最广泛的。我们近期发现，Knowles品系中表达的转基因包含一段截短的金属硫蛋白（Mt1）序列，该序列在转基因小鼠的卵母细胞中高水平表达。这一发现促使我们寻找不表达外源性Mt1转录本的其他Zp3-Cre品系。我们测试了第二个转基因Zp3-Cre品系，随后创建了自身的转基因Zp3-Cre品系，但通过与tdTomato报告鼠杂交验证，两者均未显示卵母细胞特异性。相同测试证实了Knowles Zp3-Cre品系具有精准的卵母细胞特异性。作为Zp3-Cre的替代方案，Gdf9-iCre品系被报道具有卵母细胞特异性且从原始卵泡阶段开始表达，但该品系同样显示出较高的体细胞组织Cre表达。考虑到基因敲入策略可能确保卵母细胞特异性，我们采用CRISPR/Cas9技术将Cre插入内源性Zp3基因座。然而，该敲入品系与tdTomato雌鼠杂交后仍显示高体细胞组织表达。当Zp3-Cre敲入等位基因和Gdf9-iCre等位基因通过父系遗传时，两者均在囊胚阶段诱导Cre表达，这解释了其广泛的组织分布特性。我们得出结论：尽管研究者需注意该转基因产生的异常Mt1表达，Knowles Zp3-Cre转基因品系仍是实现卵母细胞特异性表达的最佳模型。