斑马鱼卵周液比较蛋白质组学分析:鉴定潜在的皮质颗粒相关蛋白

Comparative proteomic analysis of the zebrafish (Danio rerio) perivitelline fluid; identifying putative cortical alveoli-associated proteins

作者信息Blake A Lewis, Karen L Reader, Michael W Pankhurst, Caroline W Beck, Mark P Lokman
PMID41609126
发布时间2026-04-13
DOI10.1093/biolre/ioag012

摘要

受精时,卵子必须具备促进成功受精并在胚胎基因组激活前调节合子生长的资源。卵子激活的一个关键生物标志是皮质泡(CA)从卵子皮层同步释放到卵周液中。硬骨鱼的CA主要与其在防止多精入卵中的高度保守作用相关。然而,已分离出数种与先天免疫功能相关的CA相关蛋白。尽管越来越多的证据表明硬骨鱼CA在防止多精入卵之外具有扩展的生物学功能,但针对其整体蛋白质组组成的研究仍较为缺乏。因此,本研究旨在识别在CA胞吐作用后斑马鱼卵周液中比例上过度表达的蛋白质,以确定CA相关蛋白的候选列表。本研究采用了一种新技术,在CA胞吐作用后不久从水激活的卵子中提取PVF,避免了固定剂的使用,从而提高了PVF样品在下游质谱分析中的完整性。此外,本研究首次提供了斑马鱼卵PVF相对于卵黄和细胞质的比较蛋白质组分析。结果显示,在水激活的未受精卵中,相对于卵黄和细胞质,PVF中有44种蛋白质比例上过度表达。所得PVF蛋白质组由与碳水化合物结合和肽酶调节功能相关的蛋白质组成。其中许多蛋白质是CA来源的有力候选者,并且先前已被认为与先天免疫有关。

实验方法

产品清单

名称品牌货号
玻璃微针----
显微注射器Drummond Scientific CompanyNanoject II
培养皿----
尖头镊子----
72孔微孔板----
S-Trap迷你离心柱ProtiFi--
线性离子阱四极杆Orbitrap XL质谱仪Thermo Fisher--
Ultimate 3000纳流超高效液相色谱系统Thermo FisherUltimate 3000
LC-MS/MS系统----