意大利Candidozyma auris基因组图谱,2019至2025年:与跨机构传播和跨国转移相关的clade I亚谱系的新兴多样性

Genomic landscape of Candidozyma auris in Italy, 2019 to 2025: emerging diversity of clade I sub-lineages associated with inter-facility transmission and cross-border transfers

作者信息Vincenzo Di Pilato, Edward Willison, Luca Calabrese, Elisa Matarazzo, Laura Magnasco, Elisa Costa, Paola Morici, Daniele Roberto Giacobbe, Chiara Vismara, Malgorzata Mikulska, Gian Maria Rossolini, Matteo Bassetti, Anna Marchese
PMID42141876
发布时间2026-05
DOI10.2807/1560-7917.ES.2026.31.18.2500730

实验完整度

基于全基因组测序、系统发育分析、抗真菌耐药性突变筛查等分子流行病学实验,并包含回顾性流行病学调查。

主要模型

意大利临床/定植分离株 国际分离株(来自17个国家)

重点核对

clade I亚谱系分配(Ia至Id) 核心基因组SNP分析 抗真菌耐药相关基因突变(CDR1、ERG11、TAC1B等) 系统发育树分支支持

摘要

背景 Candidozyma auris是一种主要关注的真菌病原体,经常表现出多重耐药性,并在全球引起医疗相关爆发。意大利在2020年初经历了一次大规模的医院内爆发,随后在不同地区出现了散发病例或小规模聚集。 目的 提供意大利C. auris种群结构、基因组多样性和传播的概述。 方法 从公共数据库获得意大利C. auris分离株(n=68)的基因组序列,或通过全基因组测序获得来自先前未表征和/或近期出现(2025)的病例(n=17)的可用分离株。该序列数据集辅以国际分离株(n=139)的全基因组序列,以基于核心基因组单核苷酸多态性进行全球系统发育分析。研究了与抗真菌耐药性相关的基因突变。 结果 所有意大利分离株属于clade I(南亚),但散布在不同亚支中。亚支Ic分离株为单一谱系,其特征在于HMG1P238H突变。该谱系传播到四个地区。亚支Ib成员更多样化,与本地或输入性散发病例以及来自南欧国家零星、独立的C. auris输入后的医院内聚集相关。发现了一个推定的新亚支(Id),涉及来自意大利和东欧一个国家的分离株。亚支Ib-c-d在抗真菌耐药相关位点(CDR1、ERG11、TAC1B)表现出谱系特异性遗传特征。 结论 在意大利,C. auris菌株形成一个复杂种群,这是clade I亚谱系出现或进化的结果,在某些情况下来自其他欧洲国家的零星输入。对于跨机构转移和先前有国外医疗暴露的患者,加强筛查方案仍然至关重要。

实验结论

提炼研究问题、关键发现与证据,快速把握文章的核心贡献。

研究问题
意大利C. auris的基因组多样性和传播动态如何?
核心机制
意大利C. auris种群由clade I亚谱系(Ib、Ic、推定Id)组成,与本地克隆传播和来自南欧(如希腊、阿尔巴尼亚、罗马尼亚)的独立输入相关。
主要证据
基于85株意大利分离株和139株国际参考菌株的core-genome SNP系统发育分析,结合流行病学数据;发现亚支Ic的克隆传播(cluster Ob4)、亚支Ib的多个独立输入(cluster Ob5、Ob6)及推定亚支Id与罗马尼亚菌株的聚类。
研究意义
结果支持加强跨机构转移和国外医疗暴露患者的筛查,并强调基因组监测对于检测新输入、监测传播和指导干预措施的重要性。

研究路径

按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。

1

样本收集与测序

建立意大利C. auris基因组数据集,包括公共数据库序列和新测序序列。

从公共数据库和本研究中获取意大利C. auris分离株(n=85)的全基因组序列,包括Liguria爆发菌株(n=60)及其他地区散发病例;选用国际分离株(n=139)进行比较。

2

系统发育分析

确定意大利C. auris分离株的clade和亚支归属,并揭示其多样性和传播关系。

基于core-genome SNP构建最大似然树,使用IQ-TREE,GTR模型;比较意大利序列与国际参考序列。

3

抗真菌耐药突变筛查

检验抗真菌耐药相关基因突变是否具有亚支特异性。

使用k-mer比对(KMA)筛查CDR1、ERG11、TAC1B等位点突变,并比较不同亚支间的差异。

4

流行病学关联分析

将基因组聚类结果与流行病学数据关联,推断传播链和输入来源。

收集并分析了病例的流行病学数据,包括国外住院史、患者转移等,结合系统发育聚类解释传播动态。

研究方法

按研究目的归类文中使用的方法,便于定位所需技术。

全基因组测序与组装
抗真菌耐药突变筛查

产品清单

实验环节名称品牌货号
脑心浸出液肉汤Oxoid--
沙氏葡萄糖琼脂Oxoid--
DNeasy PowerLyzer PowerSoil试剂盒Qiagen--
NovaSeq平台Illumina--

关键环节

汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。

环节核对要点
菌株培养
培养基类型、培养温度和时间
阅读提示:Methods: Storage of fungal isolates and culturing conditions
DNA提取
DNA提取试剂盒
阅读提示:Methods: Whole genome sequencing and bioinformatics
全基因组测序
测序平台、读长
阅读提示:Methods: Whole genome sequencing and bioinformatics
系统发育分析
参考基因组版本、比对和SNP检测软件参数
阅读提示:Methods: Whole genome sequencing and bioinformatics