样本收集与测序
建立意大利C. auris基因组数据集,包括公共数据库序列和新测序序列。
从公共数据库和本研究中获取意大利C. auris分离株(n=85)的全基因组序列,包括Liguria爆发菌株(n=60)及其他地区散发病例;选用国际分离株(n=139)进行比较。
Genomic landscape of Candidozyma auris in Italy, 2019 to 2025: emerging diversity of clade I sub-lineages associated with inter-facility transmission and cross-border transfers
基于全基因组测序、系统发育分析、抗真菌耐药性突变筛查等分子流行病学实验,并包含回顾性流行病学调查。
意大利临床/定植分离株 国际分离株(来自17个国家)
clade I亚谱系分配(Ia至Id) 核心基因组SNP分析 抗真菌耐药相关基因突变(CDR1、ERG11、TAC1B等) 系统发育树分支支持
提炼研究问题、关键发现与证据,快速把握文章的核心贡献。
按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。
建立意大利C. auris基因组数据集,包括公共数据库序列和新测序序列。
从公共数据库和本研究中获取意大利C. auris分离株(n=85)的全基因组序列,包括Liguria爆发菌株(n=60)及其他地区散发病例;选用国际分离株(n=139)进行比较。
确定意大利C. auris分离株的clade和亚支归属,并揭示其多样性和传播关系。
基于core-genome SNP构建最大似然树,使用IQ-TREE,GTR模型;比较意大利序列与国际参考序列。
检验抗真菌耐药相关基因突变是否具有亚支特异性。
使用k-mer比对(KMA)筛查CDR1、ERG11、TAC1B等位点突变,并比较不同亚支间的差异。
将基因组聚类结果与流行病学数据关联,推断传播链和输入来源。
收集并分析了病例的流行病学数据,包括国外住院史、患者转移等,结合系统发育聚类解释传播动态。
按研究目的归类文中使用的方法,便于定位所需技术。
| 实验环节 | 名称 | 品牌 | 货号 |
|---|---|---|---|
| 菌株培养 | 脑心浸出液肉汤 | Oxoid | -- |
| 沙氏葡萄糖琼脂 | Oxoid | -- | |
| DNA提取 | DNeasy PowerLyzer PowerSoil试剂盒 | Qiagen | -- |
| 全基因组测序 | NovaSeq平台 | Illumina | -- |
汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。
| 环节 | 核对要点 |
|---|---|
| 菌株培养 | 培养基类型、培养温度和时间 阅读提示:Methods: Storage of fungal isolates and culturing conditions |
| DNA提取 | DNA提取试剂盒 阅读提示:Methods: Whole genome sequencing and bioinformatics |
| 全基因组测序 | 测序平台、读长 阅读提示:Methods: Whole genome sequencing and bioinformatics |
| 系统发育分析 | 参考基因组版本、比对和SNP检测软件参数 阅读提示:Methods: Whole genome sequencing and bioinformatics |