骨关节炎滑膜成纤维细胞响应纤连蛋白基质因子驱动炎症反应并损害软骨细胞功能

目的：研究基质因子纤连蛋白片段（FN7–10）对人骨关节炎（OA）滑膜成纤维细胞的影响及其对炎症和软骨降解的意义。设计：从50例接受膝关节置换术的OA患者获取关节组织。分离的滑膜成纤维细胞用1 μM FN7–10或PBS对照处理。使用细胞因子蛋白阵列鉴定条件培养基（CM）中差异分泌的炎症介质。使用批量RNA-seq评估转录变化。使用transwell实验中的单核细胞THP-1细胞评估CM的趋化活性。通过qPCR和流式细胞术评估THP-1细胞的巨噬细胞分化。通过qPCR评估软骨细胞基因表达，并通过阿尔辛蓝实验评估糖胺聚糖（GAG）产生。结果：FN7–10刺激滑膜成纤维细胞诱导炎症分泌组，包括趋化因子的产生。RNA-seq分析证实FN7–10诱导趋化因子（包括CCL5、CCL7、CCL8、CCL20、CXCL5和CXCL10）上调，其平均转录log-2倍变化为3.89（CI，2.81 – 4.97）。来自FN7–10刺激的滑膜成纤维细胞的CM使THP-1趋化性增加7.8倍（CI，3.26 – 12.35），该效应被CCR2或CXCR2抑制剂减弱，并促进单核细胞向巨噬细胞分化，其特征在于促炎基因表达和CD14增加。用FN7–10滑膜成纤维细胞CM处理的软骨细胞显示IL6和MMP1升高，ACAN和COL2A1表达降低，以及GAG水平降低。结论：基质因子FN7–10促进炎症性滑膜成纤维细胞表型。从活化的滑膜成纤维细胞释放的促炎介质（包括趋化因子）招募单核细胞，可能加剧关节炎症，并可促进软骨细胞分解代谢活性增加。