通过贝叶斯潜类别分析评估血浆游离DNA qPCR检测埃及血吸虫的诊断准确性：一项来自加蓬兰巴雷内孕妇队列的研究

背景：有效诊断血吸虫病（Schistosoma haematobium）对于疾病管理至关重要。然而，现有工具在低强度感染检测中常缺乏敏感性，这是近期WHO被忽视热带病路线图中指出的挑战。本研究旨在评估一种新型游离DNA（cfDNA）定量聚合酶链反应（qPCR）检测方法，该方法仅使用20 µl血浆并进行粗提DNA提取，旨在提高诊断准确性并降低分子检测在现场环境中的实施门槛。我们在加蓬兰巴雷内的孕妇中，将其性能与尿液过滤镜检和上转换报告颗粒侧流循环阳极抗原（UCP-LF CAA）检测进行了比较。方法：对加蓬296名孕妇开展了一项前瞻性横断面研究。于2018年12月至2020年11月期间收集EDTA抗凝血、尿液和粪便样本。尿液样本通过尿液过滤镜检和UCP-LF CAA进行分析。采用简化DNA提取方法，对20 µl冷冻血浆样本进行回顾性cfDNA qPCR检测。通过敏感性、特异性和一致性指标评估诊断准确性，并在缺乏金标准的情况下使用贝叶斯潜类别分析（BLCA）估计检测性能。结果：不同检测方法的阳性率存在差异：cfDNA qPCR为24.3%，尿液过滤镜检为18.6%，UCP-LF CAA为20.9%。检测间一致性有限。BLCA显示qPCR敏感性最高（74.0%，95% CrI：57.2-90.8），其次为UCP-LF CAA（65.7%，95% CrI：49.0-82.8）。镜检特异性最高（94.9%，95% CrI：89.6-99.3）。估计感染率在22.5%至27.1%之间。受试者工作特征（ROC）分析证实各检测方法性能良好（AUC 0.837-0.868），任意两种方法联合使用时性能提升（AUC最高达0.931）。结论：本研究验证了仅需20 µl血浆的新型cfDNA qPCR方法具有高敏感性，其性能与镜检及UCP-LF CAA相当。虽然镜检保持高特异性，但将其与qPCR或UCP-LF CAA等高敏感性检测结合可显著提升诊断效能。进一步优化这种简化qPCR检测的特异性，将推动我们实现高精度、可行的床旁诊断方案，这对资源有限地区的血吸虫病控制计划至关重要。