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普通狨猴精子冷冻保存后高质量精子的回收
Recovery of high-quality sperm after cryopreservation in the common marmoset (Callithrix jacchus)†
摘要
普通狨猴（Callithrix jacchus）因其在遗传、解剖和生理上与人类相似，成为临床前生物医学研究中极具潜力的动物模型。辅助生殖技术能够最大化圈养研究狨猴群体的潜力，包括保存和繁殖具有理想遗传特性或经过基因修饰的个体。目前关于狨猴精子冷冻保存的文献较少，现有方案尚未完全优化，且评估有限。本研究优化并标准化了普通狨猴精子冷冻保存的关键环节，对冻融后精子质量进行了全面评估，并确定了便于广泛推广的可行方案。尽管冷冻保存后精子活力较新鲜精子显著下降，但在长达6个月的不同冷冻保存时长中未发现显著差异。此外，冻融后的平均恢复率分别为66%（总活力）和36%（前向运动活力），优于先前报道的结果。新鲜精子与冻融精子在关键结构参数（包括顶体完整性和DNA碎片率）上无显著差异。本研究改进的狨猴精子冷冻保存方案将有助于促进遗传多样性及/或基因编辑精子在研究及群体管理中的共享，并为未来提升该物种及其他非人灵长类动物冻融精子应用效果的研究奠定坚实基础。
实验方法
产品清单
| 名称 | 品牌 | 货号 |
|---|---|---|
| FertiCare个人振动器 | Multicept ApS | -- |
| 0.5毫升管 | -- | -- |
| SpermVision SAR 版本1.1 | Minitube US | -- |
| 深度20微米的一次性计数玻片 | Minitube US | -- |
| 蔡司AxioLab显微镜 | Zeiss | -- |
| SpermFreeze溶液 | VitroLife | -- |
| 0.25毫升法式细管 | -- | -- |
| 迷你热封机 | -- | -- |
| 程序降温冷冻仪 | Thermo Scientific | -- |
| 聚苯乙烯泡沫盒 | -- | -- |
| 液氮储存罐 | -- | -- |
| 37°C水浴锅 | -- | -- |
| 1.7毫升管 | -- | -- |
| 玻璃载玻片 | -- | -- |
| AxioImager M1荧光显微镜 | Zeiss | -- |
| AxioCam MRm相机 | Zeiss | -- |
| 带电荷玻璃载玻片 | -- | -- |
| 蔡司3通道共聚焦系统显微镜LLC LSM800 | Zeiss | LSM800 |
| Halosperm G2试剂盒 | Halotech | -- |
| 盖玻片 | -- | -- |
| AxioImager M1显微镜 | Zeiss | -- |
| 迷你离心机 | -- | -- |
| 徕卡EM UC6超薄切片机 | Leica | EM UC6 |
| 钻石刀 | -- | -- |
| 150目铜网 | -- | -- |
| 微波炉 | -- | -- |
| JEOL JEM-1400透射电子显微镜 | JEOL | JEM-1400 |
| AMT图像捕获引擎，版本7 | AMT | Version 7 |