α-gal特异性人IgE抗体促进α-gal诱导及抗原非依赖性过敏效应细胞活化

背景：在α-gal综合征（AGS）中，免疫球蛋白（Ig）E抗体针对哺乳动物产品中的聚糖半乳糖-α-1,3-半乳糖（α-gal）形成，而非食物蛋白质。α-gal糖脂和糖蛋白以IgE依赖的方式激活用AGS血浆致敏的人嗜碱性粒细胞。然而，尚不清楚α-gal特异性IgE是否独立于其他血液蛋白质足以介导嗜碱性粒细胞和肥大细胞活化。目的：我们旨在确定α-gal抗原是否能激活被动致敏的大鼠嗜碱性白血病（RBL）SX-38细胞，这些细胞表达人IgE受体，常用于模拟食物蛋白过敏中过敏原/IgE介导的肥大细胞活化。方法：利用CRISPR技术，我们创建了一种新型的α-gal缺陷型RBL细胞系——AGKO RBL SX-38，使用来自AGS供体的血清或新型α-gal特异性IgE克隆被动致敏细胞，然后用α-gal糖蛋白进行刺激。为评估效应细胞活化，我们通过流式细胞术测量活化标志物CD63的细胞表面表达，并通过β-己糖胺酶释放实验测定介质释放。结果：经α-gal抗原刺激后，与对照血清致敏的细胞相比，用AGS血清致敏的CD63+ AGKO RBL SX-38细胞百分比增加了3倍。选定的人AGS IgE克隆促进了α-gal抗原依赖性和抗原非依赖性的CD63上调。用混合AGS血清致敏的细胞以α-gal非依赖性方式释放β-己糖胺酶。在用α-gal特异性IgE克隆致敏的细胞中，我们未观察到β-己糖胺酶释放超出背景水平。结论：某些α-gal特异性人IgE克隆可能部分激活过敏效应细胞而不依赖于抗原，这可能会降低后续α-gal诱导或抗原非依赖性过敏效应细胞脱颗粒的阈值。这可能影响AGS患者过敏症状的持续时间和严重程度。