用于多重成像应用的抗体-寡核苷酸偶联策略比较评估

抗体寡核苷酸偶联物（AOCs）已成为在诊断、治疗和高维成像等领域具有广泛应用前景的通用工具。其在多重成像技术（如CODEX）中尤为重要，可实现单细胞水平的组织网络可视化。本研究评估了四种方法——马来酰亚胺修饰、胺修饰、DBCO修饰以及一种位点特异性酶法——以优化用于多重成像应用的AOCs制备。评估聚焦于偶联效率、信号亮度、稳定性、可重复性和成本效益等关键性能参数。每种偶联化学方法均被证明有效，但DBCO寡核苷酸的叠氮化学方法表现出更一致的偶联成功率和随时间推移更稳定的信号保留。与其他方案相比，该方法能产生可靠明亮的图像，并具有更优的成本效益，这一点在产生可重复空间数据的全规模CODEX多重成像实验中得到进一步证实。DBCO方法所观察到的稳定性和可重复性表明，它可能有助于减少试剂浪费和人工成本，同时促进更全面的抗体组的开发。这些发现表明，DBCO修饰的寡核苷酸偶联方法是生成用于多重成像的AOCs的一个有价值的选择，能够应对当前的不足，实现更一致、更广泛和更深度的多重分析。