编码转录组分析揭示PEG融合大鼠坐骨神经同种异体移植物的免疫耐受相关功能改变

背景：目前使用周围神经同种异体移植物（PNA）修复消融型周围神经损伤（PNI）的常规方法，常因免疫排斥以及再生轴突芽的缓慢和不准确生长而导致功能恢复不良。相比之下，采用多步骤方案（其中一步使用膜融合剂聚乙二醇（PEG））修复的消融型PNI，可在数周内永久恢复坐骨神经介导的行为，即使远交系宿主和供体组织既未免疫抑制也未组织配型。PEG融合的PNA表现出显著减少的T细胞和巨噬细胞浸润、主要组织相容性复合体I/II表达降低以及持续的低凋亡。在本研究中，我们分析了PEG融合PNA的编码转录组，以探讨免疫抑制的可能机制。方法：使用PNA结合PEG融合方案及神经缝合修复成年Sprague-Dawley大鼠的消融型坐骨神经PNI。电生理和行为测试确认PEG融合PNA成功。RNA测序分析了术后14天PEG融合PNA与阴性对照PNA（未用PEG处理）以及未手术对照神经之间蛋白编码基因的差异表达谱。测序结果通过定量逆转录PCR（RT-qPCR）验证，部分通过免疫组织化学验证。结果：PEG融合PNA表现出许多与先天性和适应性同种异体排斥反应相关的基因转录本显著下调。施万细胞相关转录本通常上调，细胞外基质重塑和细胞/组织发育等细胞过程特别富集。编码几种潜在免疫抑制蛋白（如血小板反应蛋白1和2）的转录本在PEG融合PNA中也上调。结论：本研究首次表征了PEG融合PNA的编码转录组，并确定了细胞外基质改变与同种异体排斥反应抑制之间的可能联系。结果为理解PEG介导的免疫抑制机制奠定了初步的分子基础。