利用肿瘤酸性：创新的乳酸响应启动子实现对实体瘤中CAR-T细胞活性的精准控制

背景：实体瘤中由异常代谢和乳酸积累驱动的酸性肿瘤微环境（TME）抑制嵌合抗原受体T（CAR-T）细胞的疗效，同时带来靶向非肿瘤毒性（OTOT）的安全风险。本研究旨在开发一种利用乳酸作为肿瘤特异性触发因子的新型CAR-T技术，以实现对CAR活性的精准控制。目标是适应酸性TME，同时保持强大的抗肿瘤疗效并减轻OTOT。方法：我们利用RNA测序鉴定出的乳酸敏感基因，设计了一种乳酸响应启动子（LARP）。该启动子被整合到靶向HER2的CAR中，以构建LAR CAR-T细胞。通过流式细胞术量化酸性和中性条件下的CAR表达动态。评估了表型特征（记忆标志物）、体外细胞毒性和细胞因子分泌。在我们先前构建的人源化HER2小鼠中评估体内OTOT，并在荷瘤小鼠模型中进一步测试抗肿瘤疗效和OTOT。结果：我们的研究结果表明，LARP对乳酸有响应，导致酸性条件下CAR表达增加。离体扩增的LAR CAR-T细胞在酸性条件下表现出增强的记忆表型和优越的体外肿瘤杀伤能力。在体内，LAR CAR-T细胞实现了与传统CAR-T细胞相当的肿瘤根除，并表现出显著增强的安全性，其特征在于没有急性肝毒性和最小的脱靶器官毒性。结论：我们的LARP策略利用肿瘤酸性作为CAR-T细胞的精准低/高开关。通过将强效CAR表达限制在酸性TME中，同时最小化在正常组织中的活性，LAR CAR-T克服了实体瘤中疗效和OTOT的关键障碍。这种乳酸感应范式为精准免疫治疗提供了一个可临床转化的平台。