多重冷冻免疫染色在细针穿刺活检和积液样本中的应用：初步结果

引言：细胞涂片和细胞块上的免疫细胞化学（ICC）通常每张载玻片仅能检测单一标记物，当样本细胞量较低时，常限制诊断准确性。多重冷冻免疫染色（mCryo）虽尚未常规应用于细胞病理学实践，但可能有助于克服这些限制。本研究评估了mCryo与常规制备细胞涂片上的标准ICC相比的适用性。方法：使用来自不同疾病的残留细针穿刺活检（FNAB）和积液样本。在甲醇固定细胞涂片上测试包含EpCAM、CK7、CD56、TTF-1、p40、CD45和钙视网膜蛋白（X-ZELL，新加坡）的抗体组合的mCryo染色，对应的ICC染色细胞涂片作为对照。所有载玻片均进行盲法阅片。结果：42例样本纳入分析（21例癌、8例淋巴瘤、5例黑色素瘤、8例非肿瘤性）。mCryo在大多数病例中显示出保存良好的形态学且无背景染色。EpCAM（21/21）、CK7（21/21）、p40（3/3）和TTF-1（1/1）在癌中与ICC结果匹配的真阳性率为100%。TTF-1在2/2例良性甲状腺结节样本中也呈真阳性。两种方法在所有样本中均检测到CD45标记淋巴细胞。钙视网膜蛋白仅在2/6例积液样本中为真阳性。mCryo意外地在所有黑色素瘤（5/5）中检测到CK7阳性，而ICC未检出。此外，mCryo在所有癌和黑色素瘤（26/26）中CD56也呈阳性，而ICC仅9例阳性，这引发了关于非特异性染色、抗体交叉反应或荧光色素光谱重叠的问题。结论：mCryo能够在常规制备的细胞涂片上每张载玻片同时评估多个标记物，为细胞稀少的样本提供潜在诊断优势。然而，进一步的方法和抗体组合改进及验证对于在常规实践中准确实施诊断至关重要。