随机对照试验中实时PCR与加藤-厚涂片法诊断土壤传播性蠕虫病及评估治愈效果的比较

Comparison of real-time PCR and the Kato-Katz method for the diagnosis of soil-transmitted helminthiasis and assessment of cure in a randomized controlled trial

作者信息Beatrice Barda, Christian Schindler, Rahel Wampfler, Shaali Ame, Said M Ali, Jennifer Keiser
PMID33008301
发布时间2020-10
DOI10.1186/s12866-020-01963-9

摘要

背景:在发展中国家,土壤传播蠕虫(STHs)的诊断通常基于粪便样本中虫卵的显微镜检测,采用加藤-卡茨(KK)法,该方法对低强度感染的检测灵敏度较差。在一项评估四种新型治疗方案针对鞭虫(Trichuris trichiura)及其伴随STH感染效果的随机试验框架内,我们比较了KK法和实时PCR法的性能。结果:在基线和随访时,对320名参与者的两份粪便样本进行了检查,其中一份样本采用四重复KK法和PCR分析(使用“珠磨法”进行DNA提取)。在随访时,80份样本经PCR和KK法检测均为阴性,173份样本经两种方法检测对任意STH均为阳性。相对于PCR,在随访时计算得出的KK法对鞭虫、钩虫和蛔虫(Ascaris lumbricoides)的灵敏度分别为83.6%、43.0%和53.8%。在此时间点,PCR相对于KK法的灵敏度对鞭虫为89.1%,对钩虫为72.7%,对蛔虫为87.5%。使用PCR法测得的鞭虫和蛔虫治愈率(CRs)略低。对于钩虫,KK法测得的治愈率大多显著较低,具体为:莫西菌素(moxidectin)36.7%、莫西菌素联合三苯双脒(tribendimidine)91.1%、莫西菌素联合阿苯达唑(albendazole)72.2%、阿苯达唑联合奥克太尔(oxantel pamoate)77.8%;而PCR法测得的治愈率分别为8.3%、82.6%、37.1%和57.1%。结论:总之,单次实时PCR检测对鞭虫和蛔虫的灵敏度与四重复KK法相当,但对钩虫更敏感,这对估计治疗效果有影响。采用“珠磨法”进行DNA提取的PCR方法应在流行区和能够负担所需设备的实验室中进一步推广。本研究已在ISRCTN注册(编号:20398469)。

实验方法

产品清单

名称品牌货号
Speedmill匀浆仪Analytica JenaSpeedmill
QIAamp DNA Mini试剂盒Qiagen--
QIAamp 96 DNA Blood试剂盒----
7500 ABI实时荧光定量PCR仪ThermoFischer7500 ABI
TaqMan基因表达预混液ThermoFischer--