Activin A在牙髓干细胞与内皮细胞直接共培养中调控血管形成与稳定

目的：及时建立功能性血液循环对牙髓组织再生至关重要。间充质干细胞（MSCs）可作为壁细胞稳定新生血管，加速吻合。我们的初步研究发现，牙髓干细胞（DPSCs）与人脐静脉内皮细胞（HUVECs）直接共培养可显著增强Activin A分泌。本研究旨在揭示Activin A表达的动态变化及其对血管形成和稳定的调控作用。方法：将DPSCs和HUVECs按1:1比例直接共培养3天和6天。通过qRT-PCR和ELISA评估Activin A和Follistatin的表达。将HUVECs分别暴露于100 ng/mL Activin A或由DPSC单培养和DPSC-HUVEC共培养产生的条件培养基（CM）。评估HUVEC的增殖、迁移、管形成和血管出芽。同时，在第3天和第6天分析膜结合型血管内皮生长因子受体（mVEGFR1和mVEGFR2）和可溶性VEGFR1（sVEGFR1）。结果：在DPSC-HUVEC共培养期间，Activin A的表达和分泌随时间依赖性升高。DPSC-HUVEC共培养中Follistatin表达降低，而Activin A/Follistatin比值显著增加。Activin A处理未促进DPSC向平滑肌细胞（SMC）特异性分化，而Activin A和DPSC+HUVEC-CM抑制了HUVEC的增殖、迁移、管形成和出芽。Activin A和DPSC+HUVEC-CM处理显著增加了mVEGFR1表达和sVEGFR1分泌，抑制了HUVEC血管形成。Activin A IgG通过降低VEGFR1表达和增加血管形成，部分逆转了DPSC+HUVEC-CM对HUVECs的作用。Activin A预处理下调了VEGF触发的HUVEC VEGFR2磷酸化。INHBA敲低的DPSCs破坏了预形成的HUVEC血管管状网络的稳定性。结论：DPSC-HUVEC直接共培养上调Activin A分泌，干扰HUVECs中VEGF受体的平衡，从而抑制HUVEC血管出芽并增强血管稳定。这些发现为DPSC-HUVEC直接共培养中血管稳定的旁分泌相互作用提供了新见解。