EVA1A通过调控自噬在扰动流下促进内皮细胞凋亡和炎症激活

背景：血流施加于内皮的血流动力学壁面剪切应力（WSS）决定了动脉粥样硬化病变的空间分布。低强度且方向逆转的紊乱血流（DF）通过调节内皮细胞（EC）的活性和功能促进动脉粥样硬化，而高强度单向的稳定层流（un-DF）则具有抗动脉粥样硬化作用。本研究探讨溶酶体与内质网相关蛋白EVA1A（eva-1同源蛋白A）——一种与自噬和凋亡相关的蛋白——在WSS调控内皮细胞功能障碍中的作用机制。方法：通过猪与小鼠主动脉样本以及流动刺激培养的人内皮细胞，研究WSS对EVA1A表达的影响。分别采用siRNA和吗啉寡核苷酸在体外（人内皮细胞）和体内（斑马鱼）敲低EVA1A表达。结果：促动脉粥样硬化的DF在mRNA和蛋白水平均诱导EVA1A表达上调。在DF条件下，EVA1A沉默可降低内皮细胞凋亡率、通透性及炎症标志物表达。通过自噬溶酶体抑制剂巴弗洛霉素联合自噬标志物LC3-II与p62检测自噬流发现：EVA1A敲低仅在DF环境下促进内皮细胞自噬，而在un-DF条件下无此效应。阻断自噬流会加剧DF环境中EVA1A敲低细胞的凋亡，表明自噬介导了DF诱导的内皮细胞功能障碍。机制上，EVA1A表达受TWIST1介导的血流方向调控。斑马鱼体内实验证实，敲低EVA1A同源基因可减少内皮细胞凋亡，印证了EVA1A在内皮中的促凋亡作用。结论：本研究首次发现EVA1A作为新型血流敏感基因，通过调控自噬介导促动脉粥样硬化DF对内皮细胞功能障碍的影响。