动物分组与干预
建立年轻和老年小鼠模型,并施加NMN、运动或联合干预,评估其对衰老相关指标的影响
40只雄性C57BL/6J小鼠分为5组:YS, AS, AE, ASNMN, AENMN,进行为期6周的NMN补充(300 mg/kg/天,口服灌胃)和/或有氧跑台训练,期间监测体重、摄食饮水。
Effects of Nicotinamide Mononucleotide Supplementation and Aerobic Exercise on Metabolic Health and Physical Performance in Aged Mice
包含体外细胞实验、动物模型(小鼠体内干预)、生化分子检测(Western blot、ELISA)等多个独立证据层级,并进行功能验证(运动表现、代谢指标)。
老年C57BL/6J小鼠(85周龄) 年轻C57BL/6J小鼠(8周龄) 小鼠骨骼肌(腓肠肌和比目鱼肌)样本
动物模型:C57BL/6J雄性小鼠,老年85周龄,年轻8周龄,每组8只 NMN剂量:300 mg/kg/天,口服灌胃 运动方案:跑台训练,速度从10 m/min渐进至20 m/min,持续20分钟,坡度从5°增至10° 检测时间点:干预6周后,功能测试在Day 44-49,OGTT在Day 51,代谢测量在Day 53-55 统计方法:单因素方差分析(one-way ANOVA)后Duncan事后检验,p<0.05
提炼研究问题、关键发现与证据,快速把握文章的核心贡献。
按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。
建立年轻和老年小鼠模型,并施加NMN、运动或联合干预,评估其对衰老相关指标的影响
40只雄性C57BL/6J小鼠分为5组:YS, AS, AE, ASNMN, AENMN,进行为期6周的NMN补充(300 mg/kg/天,口服灌胃)和/或有氧跑台训练,期间监测体重、摄食饮水。
评估干预对老年小鼠身体组成(脂肪量、瘦肉量、体液)的影响
使用TD-NMR系统测量各组小鼠的脂肪量、瘦肉量和自由体液。
评估NMN和运动干预对老年小鼠肌肉力量、耐力和平衡能力的影响
依次进行跑台耐力测试、前肢握力测试、负重测试、Kondziela倒挂网格测试、功能力量测试和旋转棒平衡测试。
评估干预对老年小鼠糖耐量和能量代谢的影响
进行口服葡萄糖耐量测试(OGTT)和间接测热法测量氧气消耗、二氧化碳产生、呼吸交换率和能量消耗。
测量血清生化标志物及NAMPT水平,并检测骨骼肌SirT1蛋白表达,探究潜在机制
处死后收集血液和组织,分析血清生化指标(AST, ALT等)和NAMPT浓度,通过Western blot检测腓肠肌中SirT1表达。
按研究目的归类文中使用的方法,便于定位所需技术。
| 实验环节 | 名称 | 品牌 | 货号 |
|---|---|---|---|
| 药物处理 | β-烟酰胺单核苷酸 | California Gold Nutrition | -- |
| 动物实验 | 跑台 | Muromachi Kikai | MK-680 |
| 身体组成 | 时间域核磁共振系统 | Bruker | Minispec |
| 握力测试 | 低力测试系统 | Aikoh Engineering | RX-5 |
| 葡萄糖测试 | 血糖仪 | LifeScan Inc. | ONETOUCH® |
| 代谢测量 | Oxymax间接测热系统 | Columbus Instruments | -- |
| 生化分析 | 生化分析仪 | Hitachi | 7150 |
| ELISA | NAMPT小鼠/大鼠双ELISA试剂盒 | AdipoGen Life Sciences | AG-45A-0007YEK-KI01 |
| Western blot | T-PER组织蛋白提取试剂 | Thermo Fisher Scientific | -- |
| 蛋白酶抑制剂混合物 | Roche | -- | |
| PhosSTOP磷酸酶抑制剂 | Roche | -- | |
| Bradford蛋白检测 | Bio-Rad Laboratories | -- | |
| 抗SirT1抗体 | Cell Signaling Technology | 2496 |
汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。
| 环节 | 核对要点 |
|---|---|
| 动物模型与分组 | C57BL/6J雄性小鼠,年轻组8周龄,老年组85周龄;分组:YS、AS、AE、ASNMN、AENMN,每组n=8 阅读提示:2.1节 |
| NMN补充 | NMN剂量300 mg/kg/天,口服灌胃,每周7天,持续6周 阅读提示:2.2节 |
| 运动干预 | 跑台训练:初始适应(10 m/min, 5°坡度, 10 min),后每周增加,最终至20 m/min, 10°坡度, 20 min;电刺激0.2 mA, 200ms, 1 Hz 阅读提示:2.3节 |
| 功能表现测试 | 测试顺序和时间:Day 44跑台耐力,Day 45握力,Day 46负重,Day 47倒挂,Day 48功能力量,Day 49旋转棒 阅读提示:2.5-2.10节 |
| 代谢评估 | OGTT:禁食12h,口服葡萄糖2g/kg,测0,15,30,60,120min血糖;间接测热法:Oxymax系统,48小时记录 阅读提示:2.11-2.12节 |
| 生化与分子分析 | 血清NAMPT ELISA;肌肉SirT1 Western blot(1:500抗体,GAPDH内参) 阅读提示:2.14-2.15节 |