腺相关病毒血清型在小鼠视网膜中的趋向性和转导效率

目的：腺相关病毒（AAV）已成为眼科基因治疗的首选载体。然而，对特定细胞表面受体的要求限制了AAV介导的视网膜细胞转导效率。这导致需要设计新型AAV载体以实现广泛的视网膜转导和转基因表达。然而，尚未报道这些新型AAV血清型的比较分析。在这里，我们比较了四种新型AAV血清型在野生型小鼠视网膜经玻璃体腔和视网膜下注射后的转导效率。方法：将四种不同的AAV/巨细胞病毒/增强型绿色荧光蛋白（EGFP）合成血清型（1 × 10^9基因组拷贝[GC]/眼）分别以1.0 µL经玻璃体腔或视网膜下注射递送至小鼠眼内。通过眼底检查和免疫标记在给药后1个月和2个月通过EGFP表达检查每种血清型有效转导光感受器（PR）和视网膜色素上皮（RPE）细胞的趋向性。使用视网膜电图和视运动反应评估视网膜功能。结果：在视网膜下和玻璃体腔注射的AAV/DJ和AAV/DJ8视网膜中，眼底检查和EGFP免疫标记显示最高的转导效率。与玻璃体腔递送相比，所有血清型在视网膜下注射后均成功转导PR和RPE细胞。然而，只有玻璃体腔递送的AAV27m8、AAV/DJ和AAV/DJ8能有效转导PR。AAV/DJ8在四种血清型中表现出最高的PR和RPE转导。视觉功能未受影响，血清型和PBS注射眼之间未观察到不良免疫反应。结论：合成AAV血清型根据递送途径差异性地转导PR和RPE细胞。玻璃体腔注射时，AAV/DJ8表现出最有效的PR和RPE细胞转导。