通过AAV2-hSyn-NGF基因疗法在青光眼模型中靶向保护视网膜神经节细胞

目的：本研究旨在评估通过携带神经元特异性人突触蛋白（hSyn）启动子的腺相关病毒血清型2（AAV2）递送神经生长因子（NGF）至视网膜神经节细胞（RGCs）的神经保护作用。方法：在三种青光眼模型（视神经挤压（ONC）、微珠诱导的高眼压（MB）和遗传性青光眼模型（DBA））中进行AAV2-hSyn-NGF玻璃体腔注射。通过定量聚合酶链反应（qPCR）和酶联免疫吸附试验（ELISA）确定AAV载体的最佳注射浓度。通过流式细胞术监测免疫反应。使用绿色荧光蛋白（GFP）与RGC特异性标记物RNA结合蛋白（RBPMS）的共定位来量化转导效率。通过测量RGC密度、视网膜神经纤维密度、神经节细胞复合体厚度和阳性暗视阈值反应（pSTR）来评估RGC的结构和功能结果。使用非参数Mann-Whitney U检验或Kruskal-Wallis检验确定统计学显著性（P < 0.05）。结果：确定玻璃体腔注射的最佳AAV载体浓度为每眼1 × 1010载体颗粒（VPs）。使用hSyn启动子显著提高了对RGC的靶向特异性，转导效率达到46.64% ± 2.18%。给予AAV2-hSyn-NGF在三种青光眼模型中有效保留了RGC密度、神经纤维层完整性和神经节细胞复合体厚度，同时维持了RGC功能。此外，该基因递送系统未引发可检测的免疫反应或视网膜结构损伤。结论：AAV2-hSyn-NGF基因疗法在多种青光眼模型中为RGC提供了安全有效的神经保护策略，使其成为未来青光眼患者临床试验的有希望的候选方案。