慢性束缚应激通过β-肾上腺素能和糖皮质激素信号使角膜时钟失调，改变上皮、神经、免疫和代谢状态

目的：确定慢性束缚应激（RS）作为一种验证的慢性心理应激模型，是否破坏角膜昼夜节律转录组并改变上皮、神经、免疫和代谢输出，并区分β-肾上腺素能和糖皮质激素信号的相对贡献。方法：雄性C57BL/6J小鼠在ZT3（授时时间3）每天接受RS 2小时，连续14天。队列分别接受普萘洛尔、美替拉酮或不干预；未应激的同窝小鼠作为对照。通过血浆促肾上腺皮质激素、皮质酮、肾上腺素和去甲肾上腺素水平，以及颈上神经节和肾上腺基因表达确认系统性应激激活。在24小时周期内（ZT0–ZT21）每三小时收集全角膜，并进行批量RNA测序。使用JTK_CYCLE识别节律性转录本；使用DESeq2进行差异基因筛选。评估上皮有丝分裂、免疫细胞计数、ZO-1/occludin表达、基底神经丛结构和Cochet–Bonnet角膜敏感性。结果：RS诱导节律基因广泛的相位提前和振幅衰减，并伴有下游免疫、增殖和代谢通路的重编程。表型上，RS增加角膜机械敏感性，减少中性粒细胞和γδ T细胞计数，升高上皮有丝分裂活性，并降低ZO-1/occludin表达，而基底神经长度不受影响。普萘洛尔部分恢复昼夜节律相位对齐，并改善上皮和代谢参数；美替拉酮优先增强免疫相关基因活性和免疫细胞丰度。结论：RS通过β-肾上腺素能和糖皮质激素机制破坏角膜昼夜节律输出，并损害上皮、免疫和代谢稳态。对这些神经内分泌通路的时间靶向可能代表减轻应激诱导的眼表功能障碍的策略。