雌性C57BL/6J小鼠衰老泪腺表现出与脂质失调相关的多核巨噬细胞浸润

目的：泪腺（LG）产生水性泪膜，其功能丧失与年龄相关性干眼有关。为了更好理解这一退化过程，我们评估了衰老模型中泪腺脂质代谢和炎症的变化。方法：取不同年龄（年轻，2-3个月；中年，10-14个月；老年，≥24个月）的雌性C57BL/6J小鼠泪腺切片，分别用油红O或甲苯胺蓝染色检测脂质。通过定量实时聚合酶链反应（qRT-PCR）分析和泪腺裂解物的Western blotting，确定与脂质代谢相关的基因和蛋白质表达的差异。使用光漂白方案猝灭年龄相关的自发荧光，通过共聚焦荧光显微镜评估泪腺切片中与NPC1、NPC2、CTSL和巨噬细胞（F4/80、CD11b）相关的免疫荧光随年龄的变化。结果：老年泪腺显示脂质增加，在腺泡细胞基底聚集体和腺泡外部位显著。泪腺中编码脂质代谢相关蛋白的Npc1、Npc2、Lipa和Mcoln2基因表达随年龄增长而增加。Western blotting证实老年泪腺中NPC1也显著增加。在光漂白的泪腺切片中，共聚焦荧光显微镜成像显示NPC1、NPC2和CTSL免疫荧光在F4/80标记的巨噬细胞中呈年龄相关富集。虽然所有年龄段的泪腺中均可检测到单核巨噬细胞，但这种含有NPC1、NPC2和CTSL且F4/80富集、部分CD11b阳性的新型多核巨噬细胞群在腺泡外部位随年龄增长而增加。结论：富含脂质代谢蛋白的F4/80阳性多核巨噬细胞在老年泪腺中增加，位于腺泡脂质沉积部位附近。