小鼠卵母细胞与透明带的最初分离由金属肽酶活性介导

完全生长的哺乳动物卵母细胞紧紧附着在其细胞外基质壳透明带（ZP）上，但在排卵信号发出后不久，卵母细胞便与透明带分离。卵母细胞与透明带分离的机制尚不清楚。由于ZP蛋白最初以跨膜蛋白形式分泌，我们假设卵母细胞与ZP的附着由跨膜ZP蛋白介导，而分离发生在这些蛋白被肽酶切割时。为了鉴定可能的肽酶类型，我们使用小鼠卵母细胞转录组数据集来鉴定定位于卵母细胞外部的候选肽酶。通过一组广谱靶向候选肽酶家族的小分子抑制剂筛选，我们发现只有M10和M12金属肽酶家族的抑制剂能阻止分离。使用更具选择性的抑制剂表明，分离可被GI254023X（一种针对M12家族中ADAM10选择性开发的抑制剂）阻止，但未被那些被认为对M10家族或其他在卵母细胞中表达的M12金属肽酶具有选择性的抑制剂阻止。使用一种结合小鼠ZP3潜在切割位点远端表位的抗体显示，在分离发生的时期，该表位逐渐从卵母细胞表面丢失，而抑制金属肽酶活性可阻止该表位的丢失。综合这些结果，卵母细胞与ZP的分离是由金属肽酶活性介导的。