Znhit1通过调控p21Cip1控制小鼠晶状体分化

目的：晶状体透明度对于将光线折射并聚焦于视网膜至关重要，该特性受多种因素和信号通路调控。本研究揭示了染色质重塑因子锌指HIT型结构域蛋白1（Znhit1）在维持晶状体透明度中的关键作用。方法：为探究Znhit1在晶状体发育中的作用，采用cre-loxp系统构建晶状体特异性Znhit1敲除小鼠（Znhit1Mlr10-Cre；Znhit1条件性敲除）。通过苏木精-伊红染色观察小鼠晶状体形态变化。应用RNA测序（RNA-seq）和转座酶可及染色质测序（ATAC-seq）筛选转录组变化。采用免疫荧光染色评估蛋白分布，末端脱氧核苷酸转移酶dUTP缺口末端标记染色检测细胞凋亡。通过定量RT-PCR检测mRNA表达水平，Western blot检测蛋白表达。结果：晶状体特异性条件敲除小鼠出现严重白内障、小眼畸形表型及晶状体纤维细胞分化严重异常。晶状体中Znhit1缺失导致上皮细胞增殖减少、凋亡增加。ATAC-seq显示Znhit1缺陷增加了细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂（包括p57Kip2和p21Cip1）的染色质可及性，并在mRNA和蛋白水平上调这些基因的表达。研究还发现Znhit1缺失通过上调p21Cip1表达导致晶状体纤维化。结论：本研究证实Znhit1是晶状体上皮细胞存活所必需的。Znhit1缺失引起p21Cip1过表达，进而导致晶状体纤维化，影响晶状体透明度的建立。