雷帕霉素抑制光诱导的坏死小体激活发生在野生型而非RPE65敲除小鼠视网膜中

目的：光损伤和异常视觉循环均促进多种视网膜退行性疾病的进展，但导致光感受器死亡的信号通路仍不清楚。本研究探讨了强光应激对（1）野生型和RPE65敲除小鼠坏死小体激活的影响，（2）p62/Sequestosome-1与坏死小体蛋白的相互作用，以及（3）雷帕霉素对野生型小鼠光损伤诱导的坏死小体激活和视网膜变性的影响。方法：将暗适应的rd12小鼠和129S2/Sv小鼠（有或无雷帕霉素处理）暴露于15,000勒克斯光不同时间。通过免疫印迹和免疫组织化学分析测定蛋白表达水平和亚细胞定位。锥体外节用花生凝集素染色。使用Spearman相关分析评估光感受器变性与受体相互作用蛋白激酶1（RIPK1）表达之间的相关性。通过免疫沉淀分析蛋白-蛋白相互作用。结果：强光导致野生型小鼠视网膜视杆和视锥细胞变性，伴随RIPK1-RIPK3表达显著增加、混合谱系激酶结构域样蛋白磷酸化、损伤相关分子模式蛋白释放和炎症反应。相同强光未在rd12视网膜中诱导坏死小体激活，但在接受9-顺式视网膜供给的rd12小鼠中诱导了激活。RIPK1表达水平与视杆和视锥变性程度呈正相关。光损伤上调p62自噬体货物蛋白的表达及其与坏死小体蛋白的相互作用，而雷帕霉素处理减弱了光诱导的坏死小体激活和光感受器变性。结论：坏死小体激活促进了光损伤诱导的视杆和视锥变性。视觉循环和自噬是减轻光诱导视网膜坏死性凋亡的重要治疗靶点。