兔和鼠眼中的结膜下淋巴管对VEGFC和抗代谢药物的反应

目的：表征并药理学影响兔和鼠眼中的结膜下淋巴管。方法：兔子接受结膜下注射台盼蓝或可固定荧光葡聚糖。量化了与滤过泡相关的流出途径。对天然兔结膜及注射可固定荧光葡聚糖后的组织进行了血管特异性标志物（淋巴管[podoplanin和LYVE-1]和血管[CD31]）的免疫荧光检测。在兔结膜下注射血管内皮生长因子-C（VEGFC）。使用RT-PCR和Western blot评估上述标志物的mRNA和蛋白水平。另外，小鼠研究使用Prox1-tdTomato转基因报告小鼠。结膜下注射条件包括：不注射、平衡盐溶液（BSS）、VEGFC、5-氟尿嘧啶（5FU）和两种浓度的丝裂霉素-C（MMC）。进行了两种小鼠注射方案（短和长），具有不同的随访时间和注射次数。小鼠眼球被摘除，制作平铺片，评估结膜下分支和长度。结果：兔眼显示出明显的滤过泡相关的结膜下流出途径，这些途径不同于血管，并且没有鼻侧/颞侧偏好。针对血管特异性标志物的免疫荧光显示兔结膜中存在淋巴管和血管，并且这些淋巴管与滤过泡相关的结膜下流出途径重叠。结膜下VEGFC增加了兔淋巴管（P = 0.004–0.04）而非血管（P = 0.77–0.84）的mRNA或蛋白。Prox1-tdTomato转基因报告小鼠显示天然荧光的淋巴管。结膜下VEGFC增加了小鼠淋巴管分支和长度（P ≤ 0.001–0.004），而抗代谢药物（P ≤ 0.001–0.043）在长方案中则相反。讨论：在两个动物模型中，使用不同方法，结膜下淋巴管对VEGFC和抗代谢药物均有药理学反应。这些结果可能对形成滤过泡的青光眼手术或眼部药物递送具有重要意义。