Setd1a通过组蛋白修饰调控Uhrf1在视网膜祖细胞存活和增殖中的关键作用

目的：组蛋白H3第4位赖氨酸的三甲基化（H3K4me3）促进转录基因激活，Setd1a是特异性针对H3K4的甲基转移酶。已有报道H3K4me3调控视杆光感受器分化；然而，在早期视网膜发育过程中，H3K4me3在视网膜祖细胞（RPC）增殖和分化中的作用仍不清楚。方法：利用体外视网膜外植体培养系统，通过引入shSetd1a抑制Setd1a的表达。我们通过RNA测序和ChIP实验分别检测基因的表达水平和H3K4me3水平。结果：我们发现Setd1a缺失导致晚期RPC凋亡增加和增殖失败。表达野生型SETD1A，而非缺乏催化SET结构域的SETD1A，可逆转shSetd1a诱导的表型。RNA测序显示，shSetd1a表达时增殖相关基因下调。基于公开的视网膜发育H3K4me3-ChIP测序数据，我们确定Uhrf1为Setd1a的候选靶基因。shSetd1a的表达导致Uhrf1转录水平降低，并降低Uhrf1位点的H3K4me3水平。在表达shUhrf1的视网膜外植体中观察到晚期RPC凋亡增加和增殖抑制，与shSetd1a表达视网膜中的结果相似。UHRF1的过表达不能挽救shSetd1a诱导的凋亡，但逆转了增殖抑制。结论：这些结果表明Setd1a通过调节组蛋白甲基化有助于视网膜细胞的存活和增殖，Setd1a调节Uhrf1的表达，这两个分子协同调节RPC的存活和增殖。