连接区和体细胞超突变诱导的CX4C基序对于人广谱中和抗体识别HCV E2高度保守表位至关重要

诱导能够结合病毒包膜糖蛋白的广谱中和单克隆抗体(bNAbs)是丙型肝炎病毒(HCV)疫苗研究的主要目标。研究自然感染中产生的bNAbs对此至关重要。我们制备了一种人源抗体8D6，该抗体识别从慢性丙肝患者体内分离出的HCV E2蛋白。该抗体展现出广谱中和活性，能够覆盖一组泛基因型的细胞培养来源HCV病毒颗粒(HCVcc)。功能和表位分析表明，8D6通过靶向E2上高度保守的表位，能够阻断E2与CD81之间的相互作用。我们描述了8D6谱系如何通过体细胞超突变进化以实现广谱中和能力。研究发现，由V(D)J重组产生的连接区和体细胞超突变诱导的二硫桥(C-C)基序在CDRH3中对8D6的广谱中和及结合活性至关重要。该基序在一系列HCV广谱中和抗体中保守存在，提示了一种共同的结合模式。随后，我们重建了8D6的推断种系序列(iGL)并测试了其结合亲和力和中和活性。有趣的是，8D6 iGL对1b基因型PR79L9毒株表现出相对较强的抑制活性，表明PR79L9可能作为潜在的自然病毒株，提供能够诱导bNAbs的E2序列。总体而言，我们对HCV E2特异性单抗8D6的详细表位定位和遗传学研究，进一步细化了E2上的抗原位点，揭示了生成功能性CDRH3的新机制，同时其iGL可作为探针用于鉴定潜在的HCV疫苗株。