连接区和体细胞高频突变诱导的CX4C基序对人多发性中和抗体识别HCV E2上高度保守表位至关重要

诱导结合病毒包膜糖蛋白的广谱中和单克隆抗体（bNAbs）是丙型肝炎病毒（HCV）疫苗研究的主要目标。在自然感染中产生的bNAbs的研究对此至关重要。我们生成了一种人类抗体8D6，识别从慢性丙型肝炎患者中分离的HCV E2蛋白。该抗体具有广谱中和活性，覆盖了细胞培养来源的HCV病毒粒子（HCVcc）的泛基因型 panel。功能和表位分析表明，8D6通过靶向E2上的高度保守表位来阻断E2与CD81之间的相互作用。我们描述了8D6谱系如何通过体细胞高频突变进化以实现广谱中和。我们发现，CDRH3中V(D)J重组产生的连接区和体细胞高频突变诱导的二硫键（C-C）基序对于8D6的广谱中和及结合活性至关重要。该基序在一系列广谱中和HCV抗体中是保守的，表明存在共同的结合模型。接下来，重建了8D6推断的胚系（iGL），并测试了其结合亲和力和中和活性。有趣的是，8D6 iGL对1b基因型PR79L9株介导了相对较强的抑制，这表明PR79L9可能作为一种潜在的自然病毒株，其E2序列可诱导bNAbs。总体而言，我们对HCV E2特异性mAb 8D6的详细表位作图和遗传学研究进一步细化了E2上的抗原位点，并揭示了一种产生功能性CDRH3的新机制，而其iGL可作为探针来识别潜在的HCV疫苗株。