褪黑素缓解自噬：绵羊滋养层细胞在缺氧环境中获得条件性适应力

褪黑素是支持绵羊妊娠成功的关键分子，尤其是在次优条件下。在人类中，褪黑素也以其抗氧化特性而闻名。此外，最近有报道称，褪黑素在正常与异常滋养层细胞中差异性驱动细胞命运。鉴于这些，我们假设褪黑素是滋养层细胞在妊娠早期克服缺氧环境的潜在伙伴。在此，我们探讨褪黑素对早期滋养层细胞行为的影响及其在CoCl2诱导的缺氧中的潜在缓解作用。在绵羊原代滋养层细胞（oTCs）中，用250μM褪黑素和/或200μM CoCl2处理24小时，研究了细胞功能和自噬调节。首先，褪黑素通过降低缺氧细胞条件下的H2O2水平发挥其抗氧化作用（P < 0.0001）。CoCl2抑制细胞增殖和迁移（P < 0.0001）；然而，添加褪黑素部分恢复了oTCs的功能（P < 0.05）。褪黑素介导的细胞保护作用甚至通过调节细胞命运机制，特别是自噬和凋亡来体现。在CoCl2处理的细胞中，观察到自噬标志物（BCLN1和LC3BII/LC3BI比值）的蛋白表达增加，同时mTOR磷酸化降低（P < 0.01），而褪黑素共处理后检测到自噬率降低（P < 0.01）。类似地，当同时给药时，褪黑素减弱了CoCl2诱导的凋亡增加（5.5% vs 1.8%，P < 0.01）。这些发现表明，褪黑素促进自噬而非凋亡，表明向细胞生存机制转变。此外，褪黑素在缺氧条件下增强细胞功能，表明胚胎受益于褪黑素，特别是当它被迫在次优环境中生长时。