受试者招募和分组
比较糖尿病和非糖尿病受试者伴或不伴干眼的差异
从北辰眼病研究中招募399名受试者(796只眼),根据糖尿病和干眼诊断标准分为四组。
Clinical ocular surface characteristics and expression of MUC5AC in diabetics: a population-based study
包含人群调查、临床检查、泪液MUC5AC ELISA和结膜印迹细胞学PAS染色等多个独立证据层级,并有功能验证。
糖尿病患者(伴或不伴干眼) 非糖尿病受试者(伴或不伴干眼) 结膜印迹细胞学样本
年龄50-80岁,共399名受试者(796只眼),分为4组 糖尿病诊断标准(FBG≥7.0 mmol/L,HbA1C≥6.5%等) 干眼诊断标准(OSDI≥13,FBUT≤5s或SIt≤5mm等) 泪液MUC5AC浓度测定(ELISA,20只眼/组随机抽样) 结膜杯状细胞密度(CIC,10只眼/组随机抽样)
提炼研究问题、关键发现与证据,快速把握文章的核心贡献。
按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。
比较糖尿病和非糖尿病受试者伴或不伴干眼的差异
从北辰眼病研究中招募399名受试者(796只眼),根据糖尿病和干眼诊断标准分为四组。
评估各组受试者的干眼相关指标
进行OSDI问卷、FBUT、TFO、SIt、LT-α、LLT、PBR、MG分级、角膜染色等检查。
比较各组泪液MUC5AC浓度差异
每组随机抽取20只眼,收集泪液样本,通过ELISA测定MUC5AC浓度。
比较各组结膜杯状细胞密度的差异
每组随机抽取10只眼,进行结膜印迹细胞学检查,PAS染色后计数杯状细胞密度。
评估组间差异及相关性
使用SPSS 25.0进行Kruskal-Wallis检验、Student t检验和Spearman相关分析。
按研究目的归类文中使用的方法,便于定位所需技术。
| 实验环节 | 名称 | 品牌 | 货号 |
|---|---|---|---|
| 泪膜渗透压测量 | I-PEN®渗透压系统 | I-MED Pharma Inc. | -- |
| 泪液收集 | 无荧光素Schirmer试纸条 | Tianjin Jingming New Technological Development Co. Ltd. | -- |
| 泪液样本储存 | Protein LoBind®离心管 | Eppendorf Corporation | 0030108442 |
| 蛋白浓度测定 | BCA蛋白检测试剂盒 | Cwbio | CW0014 |
| MUC5AC浓度检测 | 人MUC5AC酶联免疫吸附测定试剂盒 | Elabscience | E-EL-H2279c |
| 结膜印迹细胞学 | PAS染色试剂盒(细胞) | Solarbio | G1360 |
| 泪液LT-α检测 | LT-α临床检测装置 | Seinda Biomedical Corporation | -- |
| 睑板腺评估 | 睑板腺评估器 | Tear Science Inc. | -- |
| 脂质层厚度测量 | LipiView® II眼表干涉仪 | Tear Science Inc. | -- |
| 样本量计算 | PASS 2021功效分析与样本量软件 | NCSS, LLC. | -- |
汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。
| 环节 | 核对要点 |
|---|---|
| 受试者纳入 | 年龄50-80岁,北辰地区居民,糖尿病和干眼诊断标准 阅读提示:Materials and methods - Subjects 和 Groups |
| 泪液收集 | Schirmer试纸条放置5分钟,无表面麻醉,-80°C储存 阅读提示:Materials and methods - Tear sample collection |
| MUC5AC ELISA | 每组20只眼随机抽样,标准化至泪液总蛋白 阅读提示:Materials and methods - Assay for MUC5AC concentration |
| 结膜印迹细胞学 | 每组10只眼随机抽样,H-PVDF膜压力5-10秒,PAS染色,×40计数三个区域 阅读提示:Materials and methods - Conjunctival impression cytology |
| HbA1c亚组分析 | HbA1c≥7.8%与<7.8%分组 阅读提示:Materials and methods - Groups |