糖尿病患者临床眼表特征及MUC5AC表达:一项基于人群的研究

Clinical ocular surface characteristics and expression of MUC5AC in diabetics: a population-based study

作者信息Zijie Fang, Ke Liu, Emmanuel Eric Pazo, Fei Li, Lianqing Chang, ZhongFang Zhang, Caijie Zhang, Yue Huang, Ruibo Yang, Hui Liu, Chen Zhang, Shaozhen Zhao
PMID39069550
发布时间2024-11
DOI10.1038/s41433-024-03252-5

实验完整度

高

包含人群调查、临床检查、泪液MUC5AC ELISA和结膜印迹细胞学PAS染色等多个独立证据层级,并有功能验证。

主要模型

糖尿病患者(伴或不伴干眼) 非糖尿病受试者(伴或不伴干眼) 结膜印迹细胞学样本

重点核对

年龄50-80岁,共399名受试者(796只眼),分为4组 糖尿病诊断标准(FBG≥7.0 mmol/L,HbA1C≥6.5%等) 干眼诊断标准(OSDI≥13,FBUT≤5s或SIt≤5mm等) 泪液MUC5AC浓度测定(ELISA,20只眼/组随机抽样) 结膜杯状细胞密度(CIC,10只眼/组随机抽样)

摘要

目的:探讨糖尿病和非糖尿病受试者伴或不伴干眼病的临床特征及黏蛋白5AC(MUC5AC)的表达。方法:共纳入399名受试者(796只眼),年龄50-80岁。受试者分为4组:无糖尿病的非干眼组(正常组)、无糖尿病的干眼组、有糖尿病的非干眼组和有糖尿病的干眼组。收集人口统计学信息、空腹血糖(FBG)和糖化血红蛋白A1C(HbA1C)数据。此外,评估了眼表疾病指数(OSDI)问卷、干眼体征、泪液渗透压和睑板腺。检测了泪液MUC5AC表达和结膜杯状细胞密度(GCD)。结果:与无糖尿病的干眼组相比,有糖尿病的干眼组泪膜渗透压(TFO)显著降低,但角膜荧光素和结膜丽丝胺绿染色评分较高。与有糖尿病的非干眼组相比,有糖尿病的干眼组TFO、角膜荧光素和结膜丽丝胺绿染色评分显著升高。有糖尿病的干眼组MUC5AC浓度和GCD显著低于无糖尿病的干眼组。HbA1c水平较高(≥7.8%)的糖尿病受试者表现出较高的TFO和较短的荧光素泪膜破裂时间。结论:伴有干眼的糖尿病患者表现出显著更高的角膜荧光素和结膜丽丝胺绿染色评分。糖尿病患者的结膜杯状细胞和MUC5AC显著减少。较高的TFO与糖尿病病程和HbA1c水平相关。

实验结论

提炼研究问题、关键发现与证据,快速把握文章的核心贡献。

研究问题
糖尿病和非糖尿病受试者伴或不伴干眼病的临床眼表特征和MUC5AC表达有何差异?
核心机制
糖尿病导致结膜杯状细胞减少,进而引起泪液MUC5AC降低,破坏泪膜稳定性。
主要证据
与无糖尿病的干眼组相比,有糖尿病的干眼组MUC5AC浓度和GCD显著降低(P=0.0006和P<0.0001),且角膜和结膜染色评分更高。
研究意义
糖尿病患者干眼症状与体征不一致,且眼表损害更重,提示糖尿病相关干眼可能被低估。

研究路径

按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。

1

受试者招募和分组

比较糖尿病和非糖尿病受试者伴或不伴干眼的差异

从北辰眼病研究中招募399名受试者(796只眼),根据糖尿病和干眼诊断标准分为四组。

2

干眼评估

评估各组受试者的干眼相关指标

进行OSDI问卷、FBUT、TFO、SIt、LT-α、LLT、PBR、MG分级、角膜染色等检查。

3

泪液MUC5AC浓度测定

比较各组泪液MUC5AC浓度差异

每组随机抽取20只眼,收集泪液样本,通过ELISA测定MUC5AC浓度。

4

结膜杯状细胞密度检测

比较各组结膜杯状细胞密度的差异

每组随机抽取10只眼,进行结膜印迹细胞学检查,PAS染色后计数杯状细胞密度。

5

统计分析

评估组间差异及相关性

使用SPSS 25.0进行Kruskal-Wallis检验、Student t检验和Spearman相关分析。

研究方法

按研究目的归类文中使用的方法,便于定位所需技术。

产品清单

实验环节名称品牌货号
I-PEN®渗透压系统I-MED Pharma Inc.--
无荧光素Schirmer试纸条Tianjin Jingming New Technological Development Co. Ltd.--
Protein LoBind®离心管Eppendorf Corporation0030108442
BCA蛋白检测试剂盒CwbioCW0014
人MUC5AC酶联免疫吸附测定试剂盒ElabscienceE-EL-H2279c
PAS染色试剂盒(细胞)SolarbioG1360
LT-α临床检测装置Seinda Biomedical Corporation--
睑板腺评估器Tear Science Inc.--
LipiView® II眼表干涉仪Tear Science Inc.--
PASS 2021功效分析与样本量软件NCSS, LLC.--

关键环节

汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。

环节核对要点
受试者纳入
年龄50-80岁,北辰地区居民,糖尿病和干眼诊断标准
阅读提示:Materials and methods - Subjects 和 Groups
泪液收集
Schirmer试纸条放置5分钟,无表面麻醉,-80°C储存
阅读提示:Materials and methods - Tear sample collection
MUC5AC ELISA
每组20只眼随机抽样,标准化至泪液总蛋白
阅读提示:Materials and methods - Assay for MUC5AC concentration
结膜印迹细胞学
每组10只眼随机抽样,H-PVDF膜压力5-10秒,PAS染色,×40计数三个区域
阅读提示:Materials and methods - Conjunctival impression cytology
HbA1c亚组分析
HbA1c≥7.8%与<7.8%分组
阅读提示:Materials and methods - Groups