癌细胞来源的外泌体circUHRF1诱导自然杀伤细胞耗竭并可能导致肝细胞癌对抗PD1治疗耐药

目的 自然杀伤（NK）细胞在固有抗肿瘤免疫反应中发挥关键作用。近年来，已在包括肝细胞癌（HCC）在内的多种恶性肿瘤中证实了NK细胞功能障碍。然而，人类HCC中NK细胞功能障碍的分子生物学机制仍不清楚。方法 通过qRT-PCR检测HCC组织、外泌体和细胞系中环状泛素样含PHD和环指结构域1 RNA（circUHRF1）的表达。使用超速离心法和ExoQuick外泌体沉淀溶液试剂盒从HCC细胞培养上清和HCC患者血浆中分离外泌体，并通过透射电子显微镜、NanoSight和western blotting进行表征。通过ELISA评估circUHRF1在NK细胞功能障碍中的作用。进行体内circRNA沉淀、RNA免疫沉淀和荧光素酶报告基因实验以探讨circUHRF1在NK细胞中的分子机制。在一项回顾性研究中，确定了HCC组织中circUHRF1的临床特征和预后意义。结果 在此，我们报道人类HCC组织中circUHRF1的表达高于配对的相邻非肿瘤组织。circUHRF1水平升高提示HCC患者临床预后不良和NK细胞功能障碍。在HCC患者血浆中，circUHRF1主要由HCC细胞以外泌体方式分泌，并且circUHRF1抑制NK细胞来源的IFN-γ和TNF-α分泌。血浆外泌体circUHRF1水平升高与NK细胞比例降低和NK细胞肿瘤浸润减少相关。此外，circUHRF1通过降解miR-449c-5p上调TIM-3的表达，从而抑制NK细胞功能。最后，我们显示circUHRF1可能驱动HCC患者对抗PD1免疫治疗耐药。结论 外泌体circUHRF1主要由HCC细胞分泌，通过诱导HCC中NK细胞功能障碍促进免疫抑制。circUHRF1可能驱动对抗PD1免疫治疗的耐药，为HCC患者提供潜在的治疗策略。