激光捕获蛋白质组学揭示牛输卵管上皮中精子相互作用蛋白的新候选物

输卵管近端区域（峡部）在许多哺乳动物中充当精子储存库。该储存库由上皮细胞组成，这些细胞主要将其顶端纤毛与精子结合，并确保高质量精子在排卵前存活。然而，精子与输卵管上皮之间的物种特异性分子相互作用仍然知之甚少。本研究旨在利用激光捕获蛋白质组学鉴定牛储存库中新的精子相互作用蛋白候选物。在排卵前和排卵后阶段收集同侧输卵管。将峡部和壶腹部组织样本固定、石蜡包埋、切片，并进行激光显微切割，以建立分离上皮顶端部分（包含潜在的精子相互作用蛋白）和基底部分（包含目前不位于细胞表面或未分泌的蛋白）的微样本池。通过nanoLC-MS/MS分析蛋白质，并使用t检验鉴定差异丰度蛋白（DAPs）。在顶端和基底微样本中分别鉴定出505和512种蛋白质。两个上皮部分之间仅有8/141个区域相关和1/79个周期阶段相关的DAPs是共享的，表明蛋白质表达存在选择性调控。在顶端蛋白中，有19个被预测为精子相互作用的候选物，包括膜联蛋白（ANXA）1、2、5和8；输卵管糖蛋白1（OVGP1）；电压依赖性阴离子选择性通道蛋白（VDAC）1和2；载脂蛋白A1（APOA1）。这项工作提供了牛输卵管上皮显微切割细胞区室的首次蛋白质组学表征，并提出了辅助生殖技术中改善精子质量的新候选物。