支气管刷检中细胞产量的数字图像比较:活检前后灌洗细胞学

Digital Image Comparison of Cellular Yield in Bronchial Brushing: Pre- and Post-Biopsy Lavage Cytology

作者信息Joshua Jing Xi Li, Joanna Ka Man Ng, Christopher Chan, Charlotte Ho Ying Lau, Joyce Ka Ching Ng, Rachel Lai Ping Lo, Wing Ho Yip, Jenny Chun Li Ngai, Ka Pang Chan
PMID38838662
发布时间2024
DOI10.1159/000539567

实验完整度

研究为回顾性队列分析,包括患者样本的细胞学标本,但缺乏功能或机制验证,属于观察性比较研究。

主要模型

支气管刷检细胞学标本 活检前支气管肺泡灌洗标本 活检后支气管肺泡灌洗标本

重点核对

标本类型:支气管刷检、活检前灌洗、活检后灌洗 患者纳入标准:疑似肺部恶性肿瘤且支气管镜下可见肿瘤 样本量:43名患者,118份细胞学标本 排除标准:核心活检或切除病理未证实恶性诊断的病例 统计分析:配对t检验、交叉表、Pearson相关分析

摘要

引言 支气管镜检查是一种有用的诊断工具,能够进行核心活检、钳检、支气管肺泡灌洗和支气管刷检。本研究通过数字图像分析比较支气管细胞学(包括活检前后灌洗)的细胞量,旨在通过优化支气管活检和细胞学的顺序和组合来提高诊断和肿瘤产量。 方法 对支气管刷检和活检前及活检后支气管肺泡灌洗的液基细胞学标本中的肺泡巨噬细胞、支气管上皮细胞和肿瘤细胞进行数字化全切片图像标注并计数。对肿瘤细胞与非病变细胞产量的关系进行了二次分析。 结果 总共获取了43名患者的118份细胞学标本。支气管上皮细胞计数在活检前灌洗中高于活检后灌洗(p < 0.01),但肺泡巨噬细胞和肿瘤细胞无显著差异(p > 0.05)。支气管刷检的肿瘤细胞计数高于灌洗(p = 0.018)。肺泡巨噬细胞计数在活检后灌洗中高于支气管刷检(p = 0.033);此外,刷检始终显示更高的支气管上皮细胞和肿瘤细胞计数。有33份假阴性(无肿瘤细胞)标本,支气管刷检与活检前灌洗的组合产生最少的假阴性病例。支气管上皮细胞和肺泡巨噬细胞计数与肿瘤细胞计数的相关性较弱(相关系数 = −0.168–0.203),但活检后灌洗除外(相关系数 = 0.412–0.479,p < 0.05)。 结论 支气管刷检比灌洗产生更多的肿瘤细胞,且灌洗在核心活检前或后进行不影响肿瘤细胞产量。支气管刷检与活检前灌洗的组合产生最低的假阴性率。

实验结论

提炼研究问题、关键发现与证据,快速把握文章的核心贡献。

研究问题
比较支气管刷检与活检前后支气管肺泡灌洗的细胞产量,并优化活检和细胞学采集的顺序和组合以提高诊断率。
核心机制
文中未明确说明机制。
主要证据
通过数字图像分析对支气管刷检和活检前后灌洗标本中的肿瘤细胞、支气管上皮细胞和肺泡巨噬细胞进行计数和比较,结果显示刷检的肿瘤细胞计数显著高于灌洗,且刷检与活检前灌洗组合的假阴性率最低。
研究意义
研究结果为支气管镜检查中标本采集顺序和组合的优化提供了依据,可能有助于提高肺癌的诊断率。

研究路径

按研究推进顺序梳理实验设计、验证步骤与关键观察。

1

标本采集

获取支气管刷检和活检前后灌洗的细胞学标本,以进行细胞产量比较。

对疑似肺部恶性肿瘤患者依次进行活检前灌洗、核心活检、支气管刷检和活检后灌洗。

2

标本制备和数字化

制备液基细胞学玻片并数字化,以便进行细胞计数。

使用Cytospin IV制备液基细胞学标本,双圈打印,物理清洁玻片表面,扫描并数字化。

3

细胞计数和注释

通过数字图像分析对三种细胞类型进行计数和注释,以比较产量。

使用QuPath (版本0.3.2)在数字化玻片上生成两个等效于×400放大倍数的高倍视野热点,由病理学家注释支气管上皮细胞、肺泡巨噬细胞和肿瘤细胞,并由另一位独立病理学家复核。

4

统计分析

比较不同标本类型的细胞计数,评估假阴性率及细胞间的相关性。

使用配对t检验比较不同细胞学标本的细胞计数,使用交叉表比较假阴性和真阳性标本,使用Pearson相关系数分析肿瘤细胞产量与其他细胞类型的关系。

研究方法

按研究目的归类文中使用的方法,便于定位所需技术。

产品清单

实验环节名称品牌货号
细胞离心涂片机IVShandon--
徕卡AT2玻片扫描仪Leica--
QuPath----

关键环节

汇总复现实验时建议重点确认的条件及原文阅读提示。

环节核对要点
标本采集
患者纳入标准:疑似肺部恶性肿瘤且支气管镜下可见肿瘤
阅读提示:Methods部分
标本采集
操作顺序:活检前灌洗、核心活检、支气管刷检、活检后灌洗
阅读提示:Methods部分
标本制备
使用Cytospin IV制备液基细胞学标本,双圈打印
阅读提示:Methods部分
图像分析
使用QuPath生成两个高倍视野热点,大小相当于×400放大倍数
阅读提示:Methods部分
图像分析
细胞识别标准:支气管上皮细胞(有纤毛或终末杆),肺泡巨噬细胞(胞质内有黑色碳色素),恶性肿瘤细胞
阅读提示:Methods部分