FLRT3过表达通过RND3减轻缺血再灌注诱导的血管通透性增加和肺损伤

目的 肺缺血/再灌注损伤（IRI）导致内皮屏障功能障碍和血管通透性增加。纤连蛋白富亮氨酸跨膜蛋白-3（FLRT3）已知可调节内皮细胞功能，但其在肺IRI中的作用尚不清楚。 方法 我们建立了小鼠肺I/R模型和采用人肺微血管内皮细胞（HPMECs）的缺氧/复氧（H/R）细胞培养模型。通过慢病毒介导的过表达和敲低方法评估了FLRT3操作的效果。通过组织学分析、免疫组织化学和肺损伤评分评估肺损伤。使用透射电子显微镜、伊文思蓝外渗和内皮通透性测定评估内皮屏障功能。 结果 FLRT3表达主要定位于肺内皮细胞，并在I/R损伤后下调。在I/R手术前通过尾静脉注射过表达FLRT3的慢病毒载体（LV-FLRT3，1×109 TU/ml）。FLRT3过表达通过维持血管完整性和减少I/R攻击小鼠的水肿形成，有效保护免受肺损伤。在H/R处理的HPMECs中，我们发现FLRT3蛋白经历自噬-溶酶体降解。机制上，FLRT3通过与Rho家族GTPase 3（RND3）相互作用来维持内皮屏障功能，这阻止了RhoA通路介导的细胞骨架破坏。HPMECs中FLRT3过表达促进了细胞迁移，维持了细胞骨架结构，并在H/R条件下减少了内皮通透性过高。重要的是，体内RND3敲低显著减弱了FLRT3对I/R损伤的保护作用，表现为肺损伤评分、血管通透性和RhoA通路激活增加。 结论 我们的研究结果揭示了FLRT3通过RND3-RhoA通路在IRI期间对内皮屏障功能的关键调节因子，是肺IRI的潜在治疗靶点。