Dicer新合成调控血小板反应性：在2型糖尿病中发生改变的一种机制

背景：尽管无核，血小板含有mRNA并合成新蛋白质。血小板也含有microRNA和Dicer（核糖核酸酶III酶Dicer-1），后者是microRNA成熟所必需的酶。在2型糖尿病（T2DM）患者血小板中，Dicer和某些microRNA的表达降低。然而，Dicer在血小板功能调节及T2DM相关血小板高反应性中的作用尚不清楚。我们旨在评估Dicer水平在血小板激活时是否受到调节，是否通过触发pre-microRNA成熟来调节mRNA翻译，以及这些机制在T2DM血小板中是否失调。方法：通过Western blot、流式细胞术和液相色谱-串联质谱法评估超纯血小板中Dicer的表达。通过Western blot评估P2Y12（嘌呤能受体P2Y12）的表达，通过实时聚合酶链反应评估microRNA-223和P2RY12转录本。在Dicer缺陷和野生型小鼠中进行了体内实验，并通过四氧嘧啶诱导糖尿病。结果：来自健康个体的凝血酶激活血小板迅速新合成Dicer，导致microRNA-223成熟增加，并伴随pre-microRNA-223的消耗。microRNA-223的增加与P2RY12 mRNA（其主要靶标之一）的减少以及血小板P2Y12表达和功能的下调相关。这些机制在T2DM患者血小板中显著失调。在Dicer缺陷和糖尿病小鼠的血小板中也观察到类似的改变。先前输注低剂量凝血酶的小鼠中，ADP诱导的血小板肺血栓栓塞减少。结论：凝血酶刺激后Dicer触发的P2Y12减少可能代表血小板激活的自我调节机制，以防止不希望的血栓形成。T2DM中这种自我调节机制的失调可能有助于T2DM患者的血小板高反应性和血栓并发症增强。我们的结果表明，血小板激活过程中microRNA新形成的复杂调节作用，当失调时，可能导致心血管疾病。