靶向B7-H3的新型三特异性杀伤细胞衔接器增强自然杀伤细胞抗头颈癌活性

背景：头颈鳞状细胞癌（HNSCC）患者，尤其是人乳头瘤病毒阴性（HPV−）亚型，预后较差。此外，范可尼贫血（FA）患者具有遗传易感性，HNSCC发病率高出500至700倍。因此，需要新的更有效的疗法。由于当前免疫疗法常因肿瘤微环境（TME）中的抑制性因素而失败，我们开发了一种三特异性杀伤细胞衔接器（TriKE），向自然杀伤（NK）细胞传递多种信号，以克服缺氧TME。该TriKE由一个与NK细胞上CD16结合的骆驼科纳米抗体、一个白细胞介素（IL）-15部分，以及另一个与B7-H3抗原结合的新型骆驼科纳米抗体组成，B7-H3在肿瘤细胞表面高表达且具有特异性。方法：使用哺乳动物表达系统生成B7H3 TriKE。使用基于流式细胞术的NK细胞脱颗粒、细胞因子产生、增殖和活细胞成像细胞毒性实验评估其功能。建立急性及长期缺氧（1%氧气）模型以评估肿瘤杀伤。使用植入人HNSCC的NOD-scidIL2Rgnull（NSG）小鼠研究IL-15治疗与TriKE治疗小鼠之间的肿瘤进展、NK细胞持续存在和生存差异。结果：在HPV− HNSCC细胞系中发现高B7-H3表达，即使FA基因被敲除也是如此，癌症基因组图谱患者数据显示，在HPV− HNSCC患者中，高B7-H3表达预示较差生存期。与在健康供体中观察到的NK细胞活性类似，B7H3 TriKE增强了来自HPV− HNSCC患者（该疗法的目标人群）NK细胞的活化、扩增和细胞毒性。此外，在HNSCC三维球体模型中，B7H3 TriKE改善了NK细胞的细胞毒性。在急性和长期缺氧（1%氧气）条件下，B7H3 TriKE介导了增强的肿瘤杀伤，减轻了缺氧对NK细胞细胞毒性的损害。在体内，B7H3 TriKE治疗的小鼠表现出显著的抗肿瘤活性和延长的生存期。结论：B7H3 TriKE是一种新型免疫治疗方法，能够克服HNSCC TME中NK细胞的缺氧抑制。这些高度转化的研究为HNSCC患者提供了一种创新疗法，并将进一步开发用于临床应用。