Purescix D-荧光素钾盐产品说明书

D-荧光素钾盐

D-Luciferin potassium

产品编码：PX01001

产品组成与包装大小

货号	规格
PX01001-1	100mg
PX01001-2	1g
PX01001-3	5g

 

产品简介

D-荧光素钾盐是D-荧光素（D-Luciferin）的钾盐形式，水溶性好，可直接溶于水或常用缓冲液，无需碱溶处理。在荧光素酶（Luciferase）催化下，在 ATP、Mg²⁺、CoA 等共存条件下，该底物可在萤光素酶催化下发生氧化反应并产生稳定560 nm黄绿色荧光，发光强度与荧光素酶活性（即报告基因表达量）或细胞内 ATP 浓度成正比，可通过活体成像系统（IVIS）或化学发光仪定量检测。Purescix自产D-荧光素钾盐可穿透细胞膜，尤其适用于活细胞和活体动物实验。与钠盐形式相比，钾盐在活体注射（尾静脉、腹腔）中更为常用，溶解快、配制简单、信号衰减慢、批次稳定性好。

 

产品原理

萤光素酶编码基因（Luc 基因）是植物、细菌、哺乳动物细胞中应用最广泛的报告基因之一，将携带 Luc 基因的重组质粒转染至目标细胞，或导入大鼠、小鼠等实验动物体内后，Luc 基因可在目标细胞中稳定表达萤光素酶。

D‑荧光素与细胞或动物体内表达的萤光素酶发生特异性发光反应，通过生物发光成像技术（BLI）捕捉并量化荧光信号强度，可精准反映萤光素酶的表达水平。

 

 

 

产品信息

 

使用步骤

本品为黄色粉末，需冷冻运输，到货后请尽快按规定条件妥善保存。

建议根据实验需求，选用适宜溶剂（如无菌水、无菌 PBS 等）配制相应浓度的储存液，经分装后于 -20℃ 条件下保存；使用时于 4℃ 解冻，平衡至室温后再按实验体系稀释使用，避免反复冻融。

以下提供几种经典实验方案供参考：

1. 体外生物发光试验

（1）材料

D-荧光素钾盐、无菌纯水、完全培养基

（2）步骤

①用无菌水溶解D-荧光素钾盐，建议配制成15mg/mL的储存液，0.22μm滤膜过滤除菌。立即使用或分装后-20℃冻存，使用时4℃融化，实验前平衡至室温。

②用预热好的完全培养基将储存液稀释至适当的工作液浓度，如150μg/mL；

③去除原培养基，替换成含有D-荧光素钾盐的培养基，37℃孵育5~10min；

④进行图像采集分析；成像前在37℃下对细胞进行短时间孵育可增强信号。

2. 活体成像分析

（1）材料

D-荧光素钾盐、D-PBS或PBS

（2）步骤

①使用无菌D-PBS（w/oCa2+,Mg2+）或PBS配制 D-荧光素钾盐溶液（15mg/mL），0.22µm滤膜过滤除菌，分装后于20℃或-80℃冷冻保存，避免反复冻融。使用时4℃融化，实验前平衡至室温。

②注射剂量根据注射方式而定，具体参见表格。若荧光素注射时动物处于清醒状态，腹腔或皮下注射后需等待3 min，再通过气体麻醉或注射麻醉进行镇静；静脉注射则需立即对动物实施镇静。

注射方式	针头 / 器具		剂量与工作液浓度
静脉注射	25–27 G针头	按 10 μL/g 体重，使用 15 mg/mL D-荧光素钾盐工作液
腹腔注射	25–27 G针头	按 10 μL/g 体重，使用 15 mg/mL D-荧光素钾盐工作液
肌肉注射	27 G针头	50 μL，浓度为 1～2 mg/mL D-荧光素钾盐工作液
鼻内注射	移液枪	50 μL，浓度为 3 mg/mL D-荧光素钾盐工作液

③ 动力学曲线建立与采集频率：

腹腔或皮下注射法：每隔 5~10 min 采集一次图像，连续动态监测 40~60 min。

静脉注射法：每隔 1~5 min 采集一次图像，连续动态监测 20~30 min。

④ 信号峰值窗口参考：

腹腔或皮下注射法：底物引入后约 10~15 min 达到生物发光峰值。

静脉注射法：底物引入后约 2~5 min 即可达到发光峰值。

⑤ 成像分析：实验中应严格选择在光信号最强且稳定的“发光平台期”进行图像采集与量化分析。

 

注意事项

1. 保存和操作的过程中都要避光。如果有条件，对储存液充氮气或氩气（防止氧化），稳定性和保存时间更长。

2. 为了确保操作人员的安全与健康，实验全过程请务必穿戴实验服并佩戴一次性手套。

3. 本品所附带的部分产品技术信息仅供客户参考、学术交流与科学研究之用；我司不对所提供信息的绝对权威性与完整性作担保。

4. 本品仅供科学研究使用，严禁用于临床诊断、治疗、食品及药品等任何人体相关用途，禁止存放于普通住宅。

5. 荧光素溶解后尽量避免反复冻融，特别建议配置为储存液后分装。

6. 特别注意：本产品未经过无菌处理，如需要用于细胞培养，应先进行处理。

 

可能出现的问题及解决方案：

问题	可能原因	解决方法
发光信号弱	底物浓度不足 / 荧光素酶表达量低	提高注射剂量/延长等待时间
信号衰减过快	底物在体内代谢消耗	缩短成像时间；在峰值窗口内采集
批次间信号不可比	注射时间点不一致	严格统一注射后成像时间点
溶液出现沉淀	配制浓度过高或温度过低	降低浓度；37°C 水浴助溶