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- 申请记录(2)
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
9999
- CAS号:
5563-28-0
- 供应商:
璞睿新境
- 规格:
1mg
一、产品简介
JC-10 是一种阳离子亲脂性荧光染料,可选择性富集于线粒体基质。当线粒体膜电位较高时,JC-10 在基质中形成聚集体,发出橙色荧光;当膜电位降低(如细胞凋亡、药物损伤)时,聚集体解散为单体,发出绿色荧光。通过检测绿色/橙色荧光比值,可定量反映膜电位的变化。
相较于传统探针 JC-1,JC-10 表现出更优异的水相溶解性,能有效抑制假性聚集体的形成并显著降低背景噪声,因其高重悬稳定性而更具流式细胞术适用性。
在细胞凋亡诱导模型中,JC-10 介导的荧光比值变化幅度约为 JC-1 的 2 倍,展现出更宽的信号窗。该特征表明 JC-10 具备更高的检测灵敏度,适用于微孔板高通量筛选(HTS)及微弱线粒体膜电位波动的精确监测等场景。
二、性状与指标
| 参数 | 信息 |
|---|---|
| 结构式 | ![]() |
| CAS 号 | 5563-28-0 |
| 分子式 | C25H29Cl2IN4 |
| 分子量 | 583.34 |
| 纯度 | ≥ 99%(HPLC) |
| 外观 | 橘红至红色固体粉末 |
| 溶解性 | DMSO |
| 激发/发射(单体) | 490 nm / 525 nm(绿色) |
| 激发/发射(聚集体) | 540 nm / 590 nm(橙色) |
| 储存条件 | -20°C,避光,干燥密封 |
| 运输条件 | 湿冰运输 |
| 是否无菌 | 否 |
三、应用场景
包括但不限于以下使用场景:
- 药物线粒体毒性评价
- 线粒体功能研究
- 免疫细胞代谢研究
常用检测方法/平台:流式细胞术 、荧光显微镜、多功能酶标仪(微孔板)
四、结构确证(HNMR、LCMS)

图1. PX10001的HNMR数据


图2. PX10001的LCMS数据
结论:根据HNMR和LCMS结果,可以确证产品结构无误。
五、HPLC测定MB1834纯度≥99%

图3. PX10001的HPLC谱图
六、JC-10检测灵敏度优于JC-1

图4. 喜树碱(Camptothecin)诱导的细胞凋亡模型中 JC-1 与 JC-10 的灵敏度对比
在相同的凋亡诱导条件下,JC-10 介导的荧光比值变化幅度约为 JC-1 的 3 倍,展现出更宽的信号检测窗口,即本品(JC-10)具备显著优于 JC-1 的检测灵敏度,能够更精确地捕捉微弱的线粒体膜电位波动。
七、采用Purescix不同批次JC-10产品检测HCT-116细胞线粒体膜电位

图5. 用Purescix JC-10检测HCT-116细胞线粒体膜电位
JC-10检测HCT-116细胞线粒体膜电位。JC-10单体呈现绿色荧光,聚集形成J-聚集体后发出红色荧光,Purescix的JC-10产品可正常检测线粒体膜电位,且不同批次间的检测效果一致,证明批间稳定性一致。
八、实验中常见问题与推荐解决方案
在将JC-1更换为JC-10,或首次使用JC-10时,您可能会遇到一些操作或结果解读方面的问题。以下为您整理了常见问题的可能原因及解决方案,供您参考。
|
问题 |
可能原因 |
解决方法 |
|
绿色荧光背景偏高 |
JC-10浓度过高;染色时间过长;未充分避光 |
适当降低JC-10工作浓度;优化孵育时间;全程避光操作 |
|
绿色/橙色荧光比值变化不明显 |
阳性诱导不足;膜电位下降不充分;细胞状态欠佳 |
优化FCCP或其他诱导剂浓度及处理时间;确保细胞处于良好生长状态 |
|
实验重复性欠佳 |
加样误差;孵育时间不一致;检测时间间隔过长 |
保持一致的加样及孵育条件;建议统一时间点完成检测 |
|
流式或酶标仪检测信号波动较大 |
工作液放置时间过长;染料稳定性下降 |
工作液现配现用;染色结束后尽快完成检测 |
|
不同细胞系检测结果存在差异 |
JC-10对不同细胞系存在一定依赖性 |
建议首次使用新细胞系时进行浓度及孵育时间梯度优化,确定最佳实验条件 |
九、注意事项
- 为了确保操作人员的安全与健康,实验全过程请务必穿戴实验服并佩戴一次性手套。
- 本品所附带的部分产品技术信息仅供客户参考、学术交流与科学研究之用;我司不对所提供信息的绝对权威性与完整性作担保。
- 本品仅供科学研究使用,严禁用于临床诊断、治疗、食品及药品等任何人体相关用途,禁止存放于普通住宅。
- 荧光素溶解后尽量避免反复冻融,特别建议配置为储存液后分装。
- 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭;工作液现配现用,不建议长期保存。
- JC-10 表现存在细胞系依赖性,新细胞系使用前建议先做浓度和孵育时间梯度摸索,确定最佳条件。
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申请记录
文献和实验一、线粒体膜电位检测原理 线粒体膜电位下降是细胞凋亡早期的标志性事件,发生在细胞核凋亡特征(染色质浓缩、DNA断裂)出现之前,一旦线粒体膜电位崩溃,细胞凋亡便不可逆转。 JC-1是一种广泛用于检测线粒体膜电位∆Ψm的理想荧光探针,可以检测细胞、组织或纯化的线粒体膜电位。JC-1有单体和多聚体两种存在状态,两者发射光谱不同。在正常细胞内,线粒体膜电位较高,JC-1聚集在线粒体的基质中,形成聚合物,可产生红色荧光;凋亡早期,线粒体膜电位降低,JC-1不能聚集在线粒体基质中,此时JC-1为单体
- 1 Channel 收集的绿色荧光信号,来自 JC- 1 monomer;纵轴示 FL- 2 Channel 收集的红色荧光信号,来自 JC- 1 aggregates。5. C 图细胞群为正常对照,我把细胞群摆在近中央的位置。D 图是 CCCP 处理过的细胞,相对于对照,可见 CCCP 处理的细胞群往右下方发生移动,即红色荧光减弱,绿色荧光增强,这表明 CCCP 处理导致线粒体膜电位下降。6. 如何定量分析:通过 winMDI 2.9 软件可分别得到 FL- 1 channel 和 FL- 2 Channel
染料的浓度,引起假去极化。荧光探针JC-1是一种阳离子型的亲脂性染料,能够自由穿过细胞膜,随细胞膜电位的变化而在膜两侧保持动态平衡。其特点是线粒体膜电位低时浓度低,主要以单体形式存在,488nm激发时最大发射波长为527nm,呈绿色荧光,胞浆相对线粒体为低电位,形成流式图中所有细胞FL1均为阳性;膜电位高时浓度高形成聚集体,488nm激发时的最大发射波长为590nm,红色荧光。活细胞线粒体膜电位高,线粒体内JC-1聚集体的浓度高,红色荧光很强,在流式图上表现为FL1和FL2双阳性,而凋亡细胞则大多








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