艾普迪 Cytospin系列涂片机在慢性呼吸道疾病研究领域的应用

        研究表明上呼吸道炎性疾病与调控纤毛形成的叉头框转录因子J1 (FOXJ1)的异常表达有关。本文探讨FOXJ1异常定位是否与鼻息肉(NP)的疾病严重程度以及并发症(过敏性鼻炎或哮喘)共存相关。

        通过对Cytospin3离心制备的原代单细胞样本进行免疫荧光染色，初步确定FOXJ1在鼻黏膜上皮的表达方式，定义为正常(Normal, N)、中间(Intermediate, I)、错位(Mislocation, M)和缺失(Absence, A)四种不同的定位模式；应用半定量评分系统对每张石蜡切片进行FOXJ1定位评分。此外，采用实时荧光定量聚合酶链反应检测FOXJ1 mRNA表达水平来探究表达差异。

图1 FOXJ1评分及mRNA表达与NP疾病严重程度及并发症的相关性

• FOXJ1定位评分与Lund-Mackay评分呈正相关(r = 0.362, P = 0.007)。在原代离心单细胞样本中，FOXJ1定位模式为N、I、M和A在NP患者中的平均百分比分别为15.0%、3.3%、53.3%和28.3%，在对照组中分别为82.5%、5.0%、5.0%和7.5% (P < 0.001，表1)。

表1:FOXJ1在原代离心单细胞样本的定位统计表

结论

        FOXJ1异常定位与疾病严重程度及和过敏性鼻炎或哮喘并发症相关，可能成为评估和干预鼻息肉治疗的新靶点。

        鼻息肉(NP)是一种慢性上呼吸道炎性疾病，常由宿主防御缺陷引发。然而对屏障功能受损机制尚不清楚。本文评估NP患者的纤毛超微结构标记物和纤毛形成标记物的表达以及纤毛细胞表型的情况。

        临床上获取97例鼻息肉NP组织和32例对照下鼻甲的活检样本进行单细胞涂片（Cytospin3）染色、免疫荧光染色和定量聚合酶链反应；根据超微结构标记物在鼻粘膜上皮共定位的三种模式（A-C型），建立半定量评分系统来评估放射辐条头蛋白（RSPH1、RSPH4A和RSPH9）和外动力臂蛋白(DNAH5)的表达情况，进一步探究其与纤毛生成标记物（CP110和FOXJ1）的关联性。

• NP患者中RSPH1、RSPH4A、RSPH9和DNAH5表达评分的中位数显著高于对照组，尤其在嗜酸性粒细胞型NP组；两组的RSPH1、RSPH4A、RSPH9和DNAH5表达模式评分均呈正相关；在原代单细胞标本不仅发现NP组蛋白异常表达模式更为明显（表2）；而且观察到纤毛长度显著大于对照组；

表2：原代单细胞标本中纤毛超微结构标记物的表达模式

• 纤毛生成标志物CP110和FOXJ1的总荧光强度与对照组相比显著升高，且与RSPH1、RSPH4A、RSPH9和DNAH5的表达模式评分呈正相关（图2）。

图2：NP组和对照组中CP110和FOXJ1的表达水平的比较

结论

        NP患者(尤其是嗜酸粒细胞性NP) 在慢性炎症环境下，纤毛生成上调与纤毛超微结构标志物（如DNAH5）的异常表达相关。