艾普迪 HM450平推式切片机，成就猴脑冷冻切片的精细之作

19 人阅读发布时间：2026-01-30 15:36

背景介绍

非人灵长类动物，因其与人类在遗传、生理和行为上的高度相似性，在生物医学研究中，常作为实验模型用于探索人类疾病机制和药物研发。猴脑与人脑在结构和功能上高度相似，使其成为研究人类大脑的理想模型，猴脑的冷冻切片是神经科学研究中的关键技术，能够最大程度保持组织原始结构与生理活性，为后续研究提供可靠的基础。

脑组织结构极为复杂，譬如海马体分层结构极为精细、皮层神经元密度差异大，这些结构特点对组织切片精度要求极高；更为棘手的是脑组织质地脆弱在制备冷冻切片过程中，极易出现操作不当或温度波动导致组织破裂和形态扭曲，大幅增加切片难度。因此，若想切出平整无裂痕、抗原活性完整的优质切片，切片机的精准操控和细节把控缺一不可。下面我们将为您系统地梳理艾普迪HM450平推式切片机在猴脑组织冷冻切片制备中的应用。

实验方法

1.组织取材

使用麻醉剂（20-30mg/kg）静脉注射实验猴，确保其处于深度麻醉状态，剪开胸腔暴露心脏，先用灌注泵灌注预冷生理盐水至肝脏发白后，随后持续注入4%中性福尔马林30-40分钟，确保脑组织充分固定，迅速剪开颅骨取出脑组织，用4%中性福尔马林继续固定48-72小时，确保充分固定后再转入30%的蔗糖中浸泡脱水3-5天后，大脑完全沉入杯底，可进行后续冷冻切片。

2.耗材准备

实验前先在平推式切片机样本台周围的收集槽中加入干冰，使样本台迅速降温至-20℃，待样本台充分冷却后扫去或吹走样本台表面多余的干冰，准备好冷冻包埋剂（Neg-50）、缓冲液PBS、载玻片、培养皿、小毛笔、镊子、吸引器等工具，安装锋利的一次性超优切片刀。

3.冷冻切片

组织包埋：将冷冻包埋剂（Neg-50）滴加到清理干净的样本台上。取出经过脱糖处理的组织，放置在已冷冻好的包埋剂上，继续添加冷冻包埋剂直到组织完全覆盖。在组织周围覆盖干冰，使其更快地降温，当观察到组织变白，表明组织达到适宜的冷冻状态，就可以移除组织台上多余的干冰，防止过度冷冻对组织造成损伤。

组织切片：调整样本台至合适的位置。先以50µm厚度对组织表面进行快速粗修，直到暴露出所需的目标脑区截面。将切片厚度调整到20µm的目标厚度。开始缓慢、平稳地拉动手柄进行切片，保证切片的完整性和均匀性。使用小毛笔将组织从刀具上刷下来，放入含有防冻剂溶液的培养皿中。当切片展开后，将组织转移到载玻片上，以便后续进行苏木素-伊红、尼氏染色或免疫组化等染色。