要不要血清？一文讲清血清对细胞转染的影响

在细胞转染实验中，血清的使用一直是一个备受争议的话题。那么，血清究竟对细胞转染有何影响？实验时到底该不该加血清？今天我们就来深入探讨这个问题。

 

血清是细胞培养基中的重要成分，含有蛋白质、生长因子、激素等，能够支持细胞生长和存活。然而，在转染过程中，血清的作用却较为复杂：

 

一 降低转染效率

血清中的蛋白质（尤其是带负电的蛋白质）可能干扰阳离子脂质体等转染试剂与核酸的结合，影响复合物的形成，从而降低转染效率。

对于传统的脂质体转染试剂（如Lipofectamine2000），血清的存在可能导致转染复合物不稳定，甚至引发细胞毒性。

二 增加细胞存活率

血清能提供营养因子，帮助细胞在转染过程中维持健康状态，减少因转染引起的细胞应激和死亡。

对于某些敏感细胞（如原代细胞或干细胞），无血清条件可能导致细胞状态恶化，影响实验结果。

 

那么细胞转染到底需不需要血清？

答案是：取决于细胞转染的阶段和细胞类型。

 

转染阶段

 

1.复合物形成阶段

需要无血清条件：在DNA脂质体复合物形成阶段必须使用无血清培养基（如Opti MEM），否则血清中的蛋白会干扰复合物形成，血清中的核酸酶（如DNase、RNase）可能降解未完全保护的核酸，也会影响复合物的形成。

2.转染阶段

允许含血清转染：目前市面上的转染试剂，普遍能在血清存在下不受干扰递送核酸，因此无需在转染过程中去除血清，建议转染时使用含血清培养基，尤其是比较脆弱的细胞类型。

 

细胞类型

 

不同细胞类型反应不同，例如，HeLa、293T等细胞在无血清条件下转染效率较高，而某些原代细胞或难转染细胞可能需要血清来维持活性。对于原代细胞、干细胞，建议选择兼容血清的转染试剂。不同的实验条件和操作对于转染效果也有影响。因此，对于新细胞系，建议测试含血清vs.无血清条件下的转染效率，选择最佳方案。