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抗体常见问题之IHC

目前市场上的 ELISA 试剂盒质量参差不齐，试剂盒数以千计，供应商的科研实力也相差悬殊，试剂盒的质量好坏会严重影响到检测结果的准确性。因此如何去挑选适合自己的试剂盒就显得特别重要。

Q: 什么是特定的抗体？ 抗体（Ab），也被称为免疫球蛋白（Ig），是一种Y型的蛋白质，通过Fab区域的可变区域来中和病原体，例如致病性细菌和病毒。

单克隆抗体（Monoclonal antibodies，mAb）是由B细胞产生，并能特异性靶向抗原的免疫球蛋白。单克隆抗体不仅是生物化学、分子生物学和医学研究中必不可少的工具，其在临床治疗上的应用也以革命性的速度改进了多种疑难杂症的治疗方法。

酶联免疫吸附测定（ELISA）是指将可溶性的抗原或抗体结合到固相载体上，利用抗原抗体结合专一性进行免疫反应的定性和定量检测方法。但在实际操作及分析中，总会出现各种问题，本次就 ELISA 常见问题分析汇总，希望对科研君的实验有所帮助。

预实验设置

1971 年瑞典学者 Engvail 和 Perlmann，荷兰学者 Van Weerman 和 Schuurs 分别报道将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相免疫测定方法，即酶联免疫吸附测定法 (ELISA) 。

酶联免疫吸附测定（ELISA）是指将可溶性的抗原或抗体结合到固相载体上，利用抗原抗体结合专一性进行免疫反应的定性和定量检测方法。

Q: 什么是ELISA？ELISA的常见步骤是什么？

一、ELISA的原理

通常我们可用于ELISA检测的样本是有多种类型的，如血清、血浆、尿液、细胞培养上清或组织匀浆液等，不同类型的检测样本前期的处理方法是不一样的。正确的处理样本是保证ELISA检测的正确性和准确性的第一步，下面简单介绍一下不同类型的样本的处理方法。

对于进入实验室的人来说，抗体做为免疫实验常用的工具，可谓是神通广大。选择一个合适的抗体，往往可以让我们的实验事半功倍。但市面上的抗体种类产品非常众多，琳琅满目，为了解决大家的这个烦恼，优品生物推出高品质抗原抗体，只研发生产高品质高性价比的。在这篇文章里，优品生物为大家讲解选择抗体的注意事项

你是否在选择二抗的时候遇到过以下的情况： IHC/IF多标实验中一抗二抗种属傻傻分不清？ 荧光标记不知道怎么选择？ IHC实验结果不准确，遇到高背景、假阳性的情况？ 一抗种属来源相同时，不知该选择什么样的二抗来进行同步法IF双标记染色？ IP/Co-IP后的WB实验出现非特异性条带？

抗体：是指机体由于抗原的刺激而产生的具有保护作用的蛋白质。

一、二抗是指靶向结合一抗的抗体

提起Western blot (WB)，很多人都能哭诉半宿。 这是一个基础实验，也是一个让大家头疼的实验，简称“玄学”。 话不多说，做过的都懂。

ELISA实验是一种广泛应用于生物学、医学、食品安全等领域的检测方法，但在实验过程中往往会出现一些问题，挑战实验者的耐心和技术。本文将为大家介绍常见的ELISA实验问题及解决方法，帮助大家轻松解决困扰

Q1：边缘效应?1）组织边缘与玻片粘贴不牢，边缘组织松脱漂浮在液体中，每次清洗不易将组织下面试剂洗尽所致. 解决办法：制备优质的胶片（APES或多聚赖氨酸），切出尽量薄的组织切片，不厚于4微米，组织的前期处理应规范，尽量避免选用坏死较多的组织。2）切片上滴加的试剂未充分覆盖组织，边缘的试剂容易首先变干，浓度较中心组织高而致染色深。解决办法：试剂要充分覆盖组织，应超出组织边缘2mm。用组化笔画圈时，为了避免油剂的影响，画圈应距组织边缘3-4mm。