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端粒酶存在于 85-90%的肿瘤组织中，因此通过检测端粒酶活性就有可能早期诊断大多 数 肿 瘤 。 目 前 最 常 用 的 检 测 端 粒 酶 活 性 的 方 法 就 是 TRAP (Telomeric Repeat Amplification Protocol，端粒重复片段扩增)，它利用端粒酶能在底物 DNA 末端添加不同数量的TTAGGG 序列这一特点，通过 PCR 检测延伸产物而高效检测端粒酶活性。但是传统的 TRAP 方法为终点电泳检测法，灵敏度低，没法定量，同时还容易产生气溶胶污染

WHO 规定生物制品中不能含有逆转录病毒污染，逆转录病毒种类繁多，故一般 通过检测逆转录酶活性来间接检测逆转录病毒存在与否。药典规定的检测逆转录酶的 方法是 PERT 法（Product-Enhanced Reverse Transcription），其原理是用待测 样品代替逆转录酶进行 RT-PCR，通过标准品制备的标准曲线计算出样品中是否存在 逆转录酶以及其浓度，进而推算出样本是否含有逆转录病毒及其浓度。PERT 法根据 酶活性检测，普适性广，可检测出 oncovirus、lentivirus 和 spumavirus 等几大类 已知和未知的逆转录病毒。但常规 PERT 法是两步法 RT-PCR 加电泳检测，操作繁 琐，误差大，不适合高通量操作。为克服此缺点，本公司开发了一管式实时 PERT 试 剂盒

目前最常见的替代 EB 的核酸染料 SYBR Green I（属于花氰类染料）虽然毒性比 EB 低、灵敏度比 EB 高，但由于其化学稳定性差（怕光、怕水、怕热），实验结果的 重复性差；此外，SYBR Green I 在电泳过程中能在 DNA 分子间移位，使 DNA 条带 模糊和扭曲，使得电泳清晰度和分辨率不如 EB。所以在实际应用中依然不能有效替代 EB。本产品是同时具有 EB 稳定性和 SYBR Green I 低毒性的新性核酸染料，其特点 如下： 1. 低毒。其主要成分未发现对人体有致癌性、未被列入有毒有害品，有利于保护使 用者的健康和保护日益恶化的环境。 2. 灵敏。检测灵敏度跟 EB 相当，能满足常规核酸电泳实验要求。 3. 稳定。对光、水和热的稳定性跟 EB 相当，可加入琼脂糖凝胶中反复熔化。 4. 无分子间位移现象。不会出现 SYBR 染料常见的条带模糊和扭曲现象。 5. 使用方法多样。既可以加入熔化的胶中，也可以电泳后染色，还可用于 PAGE。 6. 跟各种常用的核酸电泳缓冲液（如 TBE、TAE）兼容，但在 TBE 中背景最低。 7. 观察时可以使用现成的观察 EB 的 300nm UV 紫外仪。 8. 既可用用于 DNA 电泳染色，也可用于 RNA 电泳染色。 9. DNA 或 RNA 浓度较高时还可以直接在日光下观察（需要将胶放在黑色背景下）。 由于避免了 UV 对 DNA 的伤害，尤其适用于胶回收实验。

绝大多数 PCR 扩增，只要循环次数足够长，最终都会有非特异性扩增出现，因 此是否出现非特异扩增并不重要，重要的是在反应设定的循环次数内（一般是 40 个循环左右）是否出现非特异扩增。如果在反应设定的循环次数内出现非特异扩增， 整个实验无效。实践中，很多 PCR 的非特异扩增都是在设定的循环结束前几个循 环才开始出现，因此只要把这些非特异扩增推迟几个循环而不是彻底去除，就能得 到有效的实验结果

核酸银染的原理是银离子(Ag+）可与核酸（DNA 和 RNA）形成稳定的复合物， 然后用还原剂如甲醛在碱性环境下使 Ag+还原成银颗粒，可把核酸电泳带染成黑褐色。

致病支原体的种类很多，包括：嗜血支原体Mhf、CMhm、Cmt以上三种不属于呼吸道感染的支原体及影响呼吸道的肺炎支原体。犬猫支原体感染会引起上下呼吸道合并感染，打喷嚏、流鼻涕、流眼泪、眼睛红肿并导致结膜炎、发烧、嗜睡，食欲减退，咳嗽，痰多，最重时会导致肺炎。感染支原体给犬猫健康造成不良影响，为此本公司开发了犬猫支原体核酸检测产品。

易错 PCR（error-prone PCR）是利用天然 Taq DNA 多聚酶不具有 3′→5′校对功 能的特性，在一定条件下（如不同的 dNTP 浓度、Mg 浓度和 MnCl2 存在）能够按较 高的机率引入随机引入突变而设计。如果有适当的突变选择方法，则可从构建的突变 库选出所需突变体，用于人工诱变。本产品就是根据此原理开发得产品，它具有下列 特点： 1. 即开即用，十分简单方便，尤其在生物制药和酶学研究领域显示出了它的优越性。 2. 配方经过精心优化，突变率稳定，突变没有趋向性。易错 PCR 的突变率为 0.66% （±0.13%），详见使用手册疑难解答。 3. 比体内基因突变更快捷简单，但如果在 PCR 引物中设计位点，则可使产物克隆到 表达载体，也可以用于体内蛋白活性的筛选。 4. 可用于连续易错 PCR（sequential error-prone PCR），只需把上一次易错 PCR 的产 物用作下一次易错 PCR 的模板即可，使每一次获得的小突变累积而产生重要的有 益突变。 5. 只适用于扩增 1kb 以下的产物，对于 1kb 以上的产物，建议分段扩增。 6. 本产品足够 100 次 30uL 体系的易错 PCR 反应。 7. 本产品只能用于科研。

端粒(telomere)是由长5-15Kb的非转录重复序列TTAGGG及相关蛋白组成的特殊结构，具有维持染色体结构完整和控制细胞分裂周期的作用。端粒重复序列长度检测对衰老进程、肿瘤发生、年龄相关疾病风险等研究具有十分重要的意义。

eccDNA 就是 extrachromosomal circular DNA（染色体外环状DNA）的简称，它们是从正常基因组中分离或脱落下来，游离于染色体基因组之外的环状DNA。长度主要分布在 0.1-5Kb 之间，99%小于 25Kb。近年来研究表明，eccDNA往往在肿瘤和衰老过程中富集，以特殊的方式参与肿瘤和衰老的发生发展进程。在大部分人类癌症细胞中 eccDNA 广泛存在，且它的富集通常会促进癌基因的扩增，从而增加了癌基因的可塑性和不稳定性，因此其对肿瘤细胞的进化可能存在重要的意义。但是纯化 eccDNA，尤其是测序级的 eccDNA 一直是个难题，为此本公司开发了本产品，它具有下列特点： 1. 即开即用，直接用培养的动物细胞为起始材料，最后得到纯化的eccDNA，用户不需要自己配制各种溶液，优化各种条件。2. 基于沉淀法，不用过柱法和磁珠法，减少短的eccDNA 的丢失。3. 含专门的酶切消化环状人线粒体 DNA 步骤，降低人线粒体DNA的干扰。4. 本产品含荧光染料法滚环扩增试剂盒，进一步富集eccDNA。5. 本产品一次可以处理约 3.5×10E8 个培养细胞。6. 适用于各种悬浮培养的人细胞和贴壁培养的人细胞。7. 本产品足够 25 次 eccDNA 的纯化和扩增实验。 8. 本产品只能用于科研。

10分钟猴痘病毒核酸检测试剂盒

天净沙基因邀请您参加第九届兽医大会